混合型饲料添加剂中百里香酚香芹酚丁香酚和肉桂醛的测定高效液相色谱法定稿.doc

ICS FORMTEXT 65.120 FORMTEXT B 46 FORMTEXT DB FORMTEXT 37 FORMTEXT 山东省地方标准 DB FORMTEXT 37/T FORMTEXT XXXXX— FORMTEXT XXXX FORMTEXT FORMTEXT 混合型饲料添加剂中百里香酚、香芹酚、丁香酚和肉桂醛的测定　高效液相色谱法 FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 山东省市场监督管理局发布 DB37/ XXXXX—XXXX PAGE 1 目次 TOC \h \z \t前言、引言标题,1,参考文献、索引标题,1,章标题,1,参考文献,1,附录标识,1,一级条标题, 3 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 原理 1 4 试剂或材料 1 5 仪器设备 1 6 样品 2 7 试验步骤 2 7.1 提取 2 7.2 液相色谱参考条件 2 7.3 标准系列溶液 2 7.4 测定 2 8 试验数据处理 2 8.1 多点校准 2 8.2 单点校准 3 9 精密度 3 附　录　A （资料性附录） 百里香酚、香芹酚、丁香酚和肉桂醛标准溶液的高效液相色谱图 4 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施。 本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省饲料质量检验所、青岛农业大学。 本标准主要起草人：张玮、李会荣、杨智国、李斌、莫贞峰、李俊玲、郝智慧、黄婷婷。 混合型饲料添加剂中百里香酚、香芹酚、丁香酚和肉桂醛的测定高效液相色谱法 范围 本标准规定了混合型饲料添加剂中百里香酚、香芹酚、丁香酚和肉桂醛的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于混合型饲料添加剂中百里香酚、香芹酚、丁香酚和肉桂醛的测定。 本方法在混合型饲料添加剂中百里香酚、香芹酚、丁香酚检出限为25 mg/kg，定量限为50 mg/kg；肉桂醛的检出限为2.5 mg/kg，定量限为5.0 mg/kg。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195　动物饲料　试样的制备 原理 试样中百里香酚、香芹酚、丁香酚和肉桂醛经甲醇提取、过膜后，供高效液相色谱仪测定，外标法定量。 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 水：GB/T 6682，一级。 甲醇。 乙腈：色谱纯。 标准贮备溶液：精密称取百里香酚（CAS：89-83-8，纯度不低于98.0 %）、香芹酚（CAS：499-75-2，纯度不低于98.0 %）、丁香酚（CAS：97-53-0，纯度不低于98.0 %）和肉桂醛对照品（CAS：104-55-2，纯度不低于98.0 %）适量（精确至0.01 mg），分别置于10 mL容量瓶中，用甲醇（色谱纯）溶解并稀释至刻度，混匀，配成浓度百里香酚、香芹酚、丁香酚为10 mg/mL、肉桂醛为1.0 mg/mL的标准贮备溶液。2 ℃～8 ℃密封保存，有效期为3个月。 混合标准工作溶液：准确移取百里香酚、香芹酚、丁香酚和肉桂醛标准贮备溶液（4.4）各1.0 mL 置于同一10 mL容量瓶中，用甲醇（色谱纯）稀释定容至刻度，混匀。该溶液中百里香酚、香芹酚、丁香酚的浓度为1.0 mg/mL、肉桂醛浓度为100 μg/mL。2 ℃～8 ℃密封保存，有效期为2周。 微孔滤膜：0.45 μm，有机系。 仪器设备 高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 电子天平：感量为0.1 mg和0.01 mg； 涡旋振荡器。 样品 按GB/T 20195制备试样，至少200 g，粉碎过0.42 mm孔径的分析筛，充分混匀，装入磨口瓶中备用。 试验步骤 提取 平行做两份实验。称取试样0.1～1 g（精确至0.1 mg），置于25 mL棕色容量瓶中，加入15 mL甲醇（4.2），振荡提取10 min，用甲醇（4.2）溶解定容至刻度，混匀。上清液过0.45 μm的微孔滤膜，供上机测定。 液相色谱参考条件 色谱柱：C18柱， 长150 mm，内径4.6 mm，粒径5 μm，或性能相当者。 柱温：30 ℃。 波长：280 nm。 流动相：乙腈（4.3）+水=42+58。 流速：1.0 mL/min。 进样量：20