动物细胞融合与单克隆抗体 .ppt
关于动物细胞融合与单克隆抗体第1页,共35页,星期日,2025年,2月5日2002年12月30日,两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞“新人”是黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞的原生质体,动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,两批新人同时在“产房”—电融合仪内孕育新生命。“太空婚礼”这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术第2页,共35页,星期日,2025年,2月5日去壁人工诱导融合再生出细胞壁杂种细胞植物细胞融合脱分化再分化植物组织培养依据的原理?植物体细胞杂交过程示意图(细胞膜的流动性)(植物细胞的全能性)回忆第3页,共35页,星期日,2025年,2月5日材料:1970年,有两位科学家做了一个著名的实验:人—鼠细胞融合的实验,以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。人—鼠细胞是怎样实现融合的?动物细胞融合有什么实践意义呢?第4页,共35页,星期日,2025年,2月5日一、动物细胞融合1、概念:也称细胞杂交,两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质的单核细胞,称为杂交细胞。2、原理:细胞膜的流动性2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体第5页,共35页,星期日,2025年,2月5日正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞正在融合的鸡血细胞第6页,共35页,星期日,2025年,2月5日3、动物细胞融合过程物理方法:化学法:生物法:灭活的病毒电激等聚乙二醇(PEG)P52生物技术资料卡为什么灭活的病毒能作诱导剂?课本P52第3自然段和图2-23诱导的手段?融合后的杂交细胞经过有丝分裂后仍能形成两个完整的杂交细胞第7页,共35页,星期日,2025年,2月5日灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合灭活丧失感染性保留融合活性第8页,共35页,星期日,2025年,2月5日三种AA、AB、BB含两种生物的遗传物质3、动物细胞融合过程物理方法:化学法:生物法:灭活的病毒电激等聚乙二醇(PEG)诱导的手段?融合后细胞的类型?AB杂种细胞遗传物质有什么特点?融合结束的标志?AB核融合第9页,共35页,星期日,2025年,2月5日灭活的病毒黏附于细胞表面病毒颗粒穿通细胞膜细胞膜连通(融合)细胞融合杂交细胞动物细胞融合过程总结第10页,共35页,星期日,2025年,2月5日填表比较动物细胞融合、植物体细胞杂交的区别《创新方案》P22任何一项技术的发现都不是凭空产生的,必定有一个发展过程。动物细胞融合技术的发展简史第11页,共35页,星期日,2025年,2月5日4、意义:①突破了方法的局限,使成为可能动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体一、动物细胞融合②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段③利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为制造开辟了新途径有性杂交远缘杂交单克隆抗体第12页,共35页,星期日,2025年,2月5日二、单克隆抗体温故知新1.抗体由何种细胞产生?如何产生?2.抗体的化学本质是什么?与抗原作用的特点?主要分布在哪里?3.用传统的方法如何获得抗体?课本P52最后一自然段第13页,共35页,星期日,2025年,2月5日抗体的传统生产方法抗原反复注射动物从动物的血清中分离抗体产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。如何解决这个问题呢?单克隆抗体!该法制备抗体的缺点?第14页,共35页,星期日,2025年,2月5日动物在免疫反应的过程中,体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上,但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。因此,要想获得大量的单一抗体,必须克隆单一的B淋巴细胞,形成细胞群。1、单克隆抗体的概念单克隆抗体:单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体已免疫的B淋巴细胞(浆细胞或效应B细胞)二、单克隆抗体课本P53第1自然段由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆第15页,共35页,星期日,2025年,2月5日?怎么才能得到纯的抗体??光纯还不行,还要大量.怎么办??但,有问题:?找,什么细胞能无限繁殖呢??思路就出来了:要想获单一的纯抗体,就必须从一个B细胞出发.让B细胞大量繁殖(克