动物细胞融合与单克隆抗体 (2).ppt

关于动物细胞融合与单克隆抗体(2)第1页，共28页，星期日，2025年，2月5日(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交第2页，共28页，星期日，2025年，2月5日问题：什么是动物细胞融合？它相当于植物体细胞杂交过程的哪一步？它们的过程、基本原理、诱导融合方法和意义是否相同？（一）动物细胞融合第3页，共28页，星期日，2025年，2月5日1、什么是抗体？单克隆抗体的制备回顾2、抗体的分布？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。主要分布在血清中。第4页，共28页，星期日，2025年，2月5日第5页，共28页，星期日，2025年，2月5日抗体的传统生产方法该法制备抗体的特点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。第6页，共28页，星期日，2025年，2月5日第7页，共28页，星期日，2025年，2月5日人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。单克隆抗体的概念什么是克隆？“克隆”从英文“clone”音译而来，是指从一个共同祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。第8页，共28页，星期日，2025年，2月5日实验目的:制备单克隆抗体.实验原理：实验过程：1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验第9页，共28页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体的制备

请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？第10页，共28页，星期日，2025年，2月5日第11页，共28页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体的突出优点：特异性强、灵敏度高、纯度高、产量大容易标化生产克隆单个杂交瘤细胞，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。

原理：细胞膜的流动性、细胞增殖第12页，共28页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体的应用诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速第13页，共28页，星期日，2025年，2月5日运载药物(“生物导弹”—单抗导向，药物为弹头)治疗疾病第14页，共28页，星期日，2025年，2月5日细胞膜的流动性、细胞的全能性膜的流动性、细胞增殖酶解法去壁小鼠免疫处理、细胞分散物理法化学法物理、化学、生物法原生质体的制备融合亲本细胞的准备原生质体的融合与筛选动物细胞融合与两次筛选杂种细胞的形成与培养产特定抗体的杂交瘤细胞培养杂种植株的鉴定单克隆抗体的分离提纯单抗有助于疾病的诊断、治疗、预防获得具优良性状的杂种植株第15页，共28页，星期日，2025年，2月5日1、单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是 （）A．骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B．脾细胞之间形成的融合细胞C．骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D．脾细胞第16页，共28页，星期日，2025年，2月5日2．研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C．抗癌物质在克隆细胞中大量合成D．单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合3．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 （）A．经过免疫的B淋巴细胞B．不经过免疫的T淋巴细胞C．经过免疫的T淋巴细胞D．不经过免疫的B淋巴细胞第17页，共28页，星期日，2025年，2月5日5.实际操作中如何经过两次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞？第18页，共28页，星期日，2025年，2月5日有限稀释法稀释多次稀释将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。常用的方法有：酶联免疫吸附试验和免疫荧光测定。第19页，共28页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体与多克隆抗体第2