动物细胞融合与单克隆抗体.ppt

2.2动物细胞工程安徽省淮南市第十六中学潘荣选修3现代生物科技专题专题2细胞工程安徽省远程教育优秀作品2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体了解动物细胞融合的原理、过程和意义。理解单克隆抗体制备的过程和应用教学目标单克隆抗体的制备和应用教学重点：单克隆抗体的制备过程教学难点：重点难点问题探讨“番茄—马铃薯”（理想图）通过长期的实验，科学家们采用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”植株。如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？动物细胞也能融合吗？动物细胞融合动物融合的过程请同学们阅读课本P52动物融合教学过程动物细胞融合过程示意图灭活的病毒有丝分裂病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理：思考题1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？酶解法，如纤维素酶或果胶酶2.动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？无需，因为动物细胞无细胞壁3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？离心、电激等物理方法；PEG等化学方法4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？能还可以利用灭活的病毒进行诱导5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？不能生产单克隆抗体利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？0102思考题植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株主要用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振动、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性细胞融合的原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目2.动物细胞融合的概念动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞。二、单克隆抗体提问？1.抗体是由何种细胞产生的？效应B细胞（浆细胞）。2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。3.一种抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？动物在免疫反应过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上。4.简述获得抗体的传统途径？抗原动物体抗体抗原不纯抗体不纯刺激浆细胞如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体01体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?怎样解决这个问题？01这种方法获得的抗体有什么缺陷？产量低，纯度低，特异性差01制备过程：03杂种细胞02设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖01二、单克隆抗体免疫小鼠培养骨髓瘤细胞融合骨髓瘤细胞B淋巴细胞注射特定抗原蛋白选择培养基上培养专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性注射到小鼠体内体外培养克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞单克隆抗体制备过程示意图多种杂交细胞单克隆抗体的应用：在基础理论研究中具有重要意义1特异性强、灵敏度高等优越性。在疾病诊断、治疗和预防方面，具有生物导弹2二、单克隆抗体用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，灵敏度很高，在妊娠第8天就可以做出诊断，比原来的诊断方法提前了10天左右，可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90％以上。”知识结构动物细胞培养过程一个诱导细胞融合的新方法－－灭活的病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势单克隆抗体制备过程两个过程三个“一”教学反馈1.动物细胞融合技术最重要的用途是（）A.克服远源