动物细胞融合_单克隆抗体.pptx

动物细胞融合_单克隆抗体会计学STS“太空婚礼” 2002年１２月３０日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。一段时间后，我国首批”太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明，细胞融合率大大提高。神舟放飞强国梦挑战自我你能主持“太空婚礼”中的科研项目吗？“太空婚礼”科研项目一：植物体细胞杂交技术“太空婚礼”科研项目二： 动物细胞融合技术(1)(3)(2)(1)(4)(5)植物体细胞杂交过程示意图“太空婚礼”植物科研项目计划书项目植物体细胞杂交原理融合前处理促融方法　用途细胞膜的流动性、细胞的全能性酶解法去壁物理法　化学法过程第一步第二步第三步第四步原生质体的制备原生质体的融合与筛选杂种细胞的形成与培养杂种植株的鉴定与筛选克服远缘杂交不亲和获得具优良性状的杂种植株BBBBAAAA人工诱导筛选BAABAB异核体（杂交细胞）同核体同核体还有3个3个以上细胞的融合-------元贝驾考 / 元贝驾考2016科目一 科目四金手指考试 / 金手指驾驶员考试为什么在太空中细胞（原生质体）融合率会大大上升？为什么选用物理法诱导？太空中处于失重状态，不同种细胞（原生质体）更容易亲近；物理法 的融合效率较高,且对细胞（原生质体）的伤害小,易操作、控制和观察。请同学们阅读课本P52动物细胞融合内容问题：什么是动物细胞融合？它相当于植物体细胞杂交过程的哪一步？它们的过程、基本原理、诱导融合方法和意义是否相同？ 1.1动物细胞融合过程、原理与诱导方法 为什么灭活的病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性保留融合活性1.1动物细胞融合过程、原理与诱导方法1.2动物细胞融合的概念鼠骨髓瘤细胞鼠B淋巴细胞人工诱导 动物细胞融合（技术）：是指（在一定的条件下）两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。杂交瘤细胞1.3动物细胞融合技术的意义和应用2.1单克隆抗体的概念问题：抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？ 一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。教材中所说的抗原分子刺激淋巴细胞，说的也就是抗原决定簇刺激B淋巴细胞，使其分裂分化出特异性的效应B细胞，分泌特异性抗体。抗体的传统生产方法从血清中分离抗体多种效应B细胞多种抗体动物体内抗原 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。2.1单克隆抗体的概念读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体2.2单克隆抗体的制备问题：如何大量生产单克隆抗体？提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：从诱变育种、基因工程、细胞工程等角度有哪些可能的设计思路？设计方案：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖单克隆抗体动物细胞培养技术动物细胞融合技术杂交瘤细胞 既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖的细胞1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验实验目的:制备单克隆抗体.实验原理：实验过程：2.2单克隆抗体的制备 看书上53页图，分组讨论，单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 描述单克隆抗体制备过程步骤注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合1.注射抗原的目的是什么？选择性培养基 筛选1多种杂交细胞克隆化专一抗体检测有限稀释法培养 筛选2单克隆抗体注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合2.诱导细胞融合的手段有哪些？选择性培养基 筛选1多种杂交细胞克隆化专一抗体检测有限稀释法培养 筛选2单克隆抗体注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合3.若细胞两两融合后，有几种融合情况？选择性培养基 筛选1多种杂交细胞克隆化专一抗体检测有限稀释法培养 筛选2单克隆抗体注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合4.第一次筛选出的杂交瘤细胞为何需进行克隆化培养和专一抗体检测？选择性培养基 筛选1多种杂交细胞克隆化专一抗体检测有限稀释法培养 筛选2单克隆抗体5.实际操作中如何经过两次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞？ 有限稀释法稀释多次稀释将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。常用的方法有：酶联免疫吸附试验和免疫荧光测定。 克隆单个杂交瘤细胞，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。问题：单克隆抗体的突出优点是什么？特异性强、灵敏度高2.3单克隆抗体的应用