CD69蛋白原核表达系统构建与多克隆抗体制备技术研究.docx
CD69蛋白原核表达系统构建与多克隆抗体制备技术研究
目录
CD69蛋白原核表达系统构建与多克隆抗体制备技术研究（1）．．．．．．4
一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
目的和意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
二、文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
CD69蛋白的相关研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
原核表达系统的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
多克隆抗体的制备方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
三、实验材料与设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
主要试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
实验器材．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
操作步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
四、实验原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
抗体的制备原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
原核表达系统的机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
五、原核表达系统构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
表达载体的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
转化过程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
鉴定转化菌株．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
六、CD69蛋白原核表达体系的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
选择合适的诱导剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
改善宿主细胞的生长条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
提高蛋白质产量的方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
七、多克隆抗体制备技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
免疫动物的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
抗血清的制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
抗血清的质量控制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
八、结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
原核表达体系的稳定性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
CD69蛋白的表达量．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
抗血清的效价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
九、讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
分析原核表达体系的性能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48
讨论多克隆抗体制备的技术难点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49
探讨进一步改进的方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50
十、结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51
原核表达体系在CD69蛋白的研究中应用价值．．．．．．．．．．．．．．．．．52
多克隆抗体制备技术的应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53
展望未来研究方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56