人ULBP3aa30~177蛋白的表达及单克隆抗体的制备的开题报告.docx

人ULBP3aa30~177蛋白的表达及单克隆抗体的制备的开题报告

开题报告

一、研究的背景

NKG2D是一种重要的免疫调节受体，能够识别并结合目标细胞表面的NKG2D配体（NKG2DL），这些配体主要分为MICA/B和ULBP1-6等类型的蛋白质。研究表明，NKG2D/NKG2DL信号通路对于抗细菌、抗病毒、自身免疫等方面都具有重要的作用。其中，人ULBP3是一种NKG2DL蛋白，能够与NKG2D结合并促进自身杀伤细胞的活化。

在目前的研究中，普遍采用重组蛋白的方法来研究NKG2D/NKG2DL的相互作用，但是重组蛋白的表达与纯化过程会导致蛋白质结构发生改变，这会影响到研究结果的准确性。因此，研究ULBP3在天然环境下的活性和结构特性，能够更加准确地反映NKG2D/NKG2DL的相互作用情况。

二、研究的内容和目标

本研究拟通过以下两个方面，探究ULBP3的表达和单克隆抗体的制备：

1.ULBP3蛋白的表达及纯化方法的优化

通过对重组表达ulbp3基因和天然表达ulbp3基因的比较研究，选定一种最优的表达和纯化方法，获得天然形态下的ULBP3蛋白。利用交叉免疫反应法鉴定蛋白的纯度和活性。

2.制备ULBP3单克隆抗体

利用表达的天然形态下的ULBP3蛋白作为免疫原，建立小鼠模型，筛选出高亲和力和特异性的ULBP3单克隆抗体。

三、研究的意义

本研究所制备的天然形态下的ULBP3蛋白和单克隆抗体，将为研究NKG2D/NKG2DL调节免疫反应、克服肿瘤免疫逃逸、建立诊断标志物等提供重要的工具和方法。同时，本研究对于提高研究人员对于蛋白质表达和抗体制备的技术水平，具有积极的推广和应用价值。