伪狂犬病毒EPO基因的原核表达及其单克隆抗体的制备的开题报告.docx
伪狂犬病毒EPO基因的原核表达及其单克隆抗体的制备的开题报告
摘要
伪狂犬病毒(EIAV)是一种流行于马科动物中的病毒,致病性强,常引起马医学上的严重问题。EIAV基因组编码多个蛋白质,包括外壳蛋白(SU)和基质蛋白(MA)等。本研究目的在于通过分子生物学技术,将EIAV的EPO基因在原核表达并制备出单克隆抗体,为马科动物的疫苗研发提供实验基础。
研究将使用重组质粒将EIAVEPO基因导入到大肠杆菌E.coliBL21中进行原核表达,并纯化表达的EPO蛋白。随后,通过分子生物学技术提取纯化的EPO蛋白制备单克隆抗体。使用WesternBlot和免疫荧光等技术对表达的蛋白和制备的单克隆抗体进行验证和优化。
通过本研究,可以提高我们对EIAVEPO基因的理解,同时为该病毒的疫苗研发提供基础实验支持。
关键词:伪狂犬病毒;EPO基因;原核表达;单克隆抗体制备。
Abstract
Equineinfectiousanemiavirus(EIAV)isapathogenicviruscommonlyfoundinequineanimalsandcausesseriousproblemsintheequinemedicalfield.EIAVgenomeencodesseveralproteins,includingenvelopeprotein(SU)andmatrixprotein(MA).TheaimofthisstudyistoexpressandproducemonoclonalantibodiesagainstEIAVEPOgeneusingmolecularbiologytechniques,whichprovidesexperimentalbasisforthedevelopmentofvaccinesforequineanimals.
Inthisstudy,theEIAVEPOgenewillbeintroducedintoE.coliBL21expressionsystembyrecombinantplasmid,andtheexpressedEPOproteinwillbepurified.Subsequently,monoclonalantibodieswillbeproducedbymolecularbiologytechniquesusingthepurifiedEPOprotein.TheexpressedproteinandmonoclonalantibodieswillbevalidatedandoptimizedbyWesternBlotandimmunofluorescencetechniques.
ThisstudywillimproveourunderstandingoftheEIAVEPOgeneandprovidebasicexperimentalsupportforthedevelopmentofvaccinesagainstthisvirus.
Keywords:Equineinfectiousanemiavirus;EPOgene;prokaryoticexpression;monoclonalantibodyproduction.