生物化学蛋白质 (2).ppt
β-keratin:aβ-sheetprotein第29页,共57页,星期日,2025年,2月5日Collagen(胶原蛋白)CollagenhasanaminoacidcompositionofhighGlycontent.Procontentisalsounusuallyhigh.Theunusualmodifiedaminoacidsfoundincollagen:第30页,共57页,星期日,2025年,2月5日DuetoitshighcontentsofGly,Proandhydroxyproline,collagenfibersdonotcontaintraditionalsecondarystructures,formauniquetriplehelixinstead.Collagenisaprincipleconstituentofconnectivetissue(结缔组织)inanimals.第31页,共57页,星期日,2025年,2月5日Determinationofproteinstructures
蛋白质结构的测定方法MethodologyofanalysingproteinstructuresaX-raycrystallography(X-射线晶体衍射);bNMRspectrometry(核磁共振波谱);cAtomicforcemicroscopy(原子力显微镜);dPredictionbycomputer(计算机预测).第32页,共57页,星期日,2025年,2月5日Theanalysisofproteinstructuresismostlylimitedbypurificationandcrystallizationofprotein.Thefollowingdrawingshowsthedifficultiesinobtainingasinglecrystalofprotein在采用x-射线衍射方法测定蛋白质结构时,蛋白质纯化和蛋白质结晶是关键步骤。cellunitThiscrystalhasaC2symmetry第33页,共57页,星期日,2025年,2月5日Thehanging-dropmethodofproteincrystallization(获取蛋白质结晶的通用方法)第34页,共57页,星期日,2025年,2月5日Awell-orderedproteincrystalanditsx-raydiffractionpatterns蛋白质晶体及其x-射线衍射图谱第35页,共57页,星期日,2025年,2月5日Singleparticlemacromolecularstructuredeterminationviaelectronmicroscopy采用电子显微镜进行蛋白质三维重构第36页,共57页,星期日,2025年,2月5日Atomicforcemicroscopy(AFM)ofbiomoleculesimagedinaqueoussolution蛋白质的二维结晶第37页,共57页,星期日,2025年,2月5日ProteinstructureatdifferentresolutionsX-射线衍射测定时,不同分辨率及其测定结果6.0?4.5?3.8?2.2?第38页,共57页,星期日,2025年,2月5日 ProteinElectrophoresis(蛋白质电泳)
SDS(dodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis)
Isoelectricfocusing(等电聚焦)
Twodimensionalelectrophoresis(2D-E;二维电泳)2DEofmembraneproteinsSDSofmembraneproteins第39页,共57页,星期日,2025年,2月5日Proteomics(蛋白质组学):什么是Omics?技术步骤:1从细胞分离总蛋白质;2电泳分离:第一向“等电聚焦”(pH);第二向”SDS”(分子量);3蛋白质定位,切割;4质谱鉴定。第40页,共57页,星期日,2025年,2月5日Massspectrometry(MS)ap