DB12_T1012—2020_食用菌液体菌种生产技术规范_天津市.docx
ICS65.020.20
DB12
B39
天津市地方标准
DB12/T1012—2020
食用菌液体菌种生产技术规范
Techniquestandardforliquidspawnproductionofediblemushroom
天津市市场监督管理委员会
发布
DB12/T1012—2020
前言
本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。
本标准由天津市农业农村委员会提出并归口。
本标准起草单位：天津市林业果树研究所。
本标准主要起草人：罗莹、周永斌、钱磊、刘连强、王文治、李凤美、訾惠君、李淑芳。
I
DB12/T1012—2020
食用菌液体菌种生产技术规范
1
范围
本标准规定了食用菌液体菌种的生产场地、设备设施、工艺流程、生产技术规程、使用方法以及标
签、贮存。
本标准适用于食用菌液体菌种的生产。
2
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB5749
生活饮用水卫生标准
GB/T12728
食用菌术语
GB50073
洁净厂房设计规范
NY5099无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求
NY/T528
食用菌菌种生产技术规程
3
罐压jar-pressure
通风量quantityofaeration
液体菌种培养过程中每分钟通入培养基中的无菌空气的量。用V/V（培养基体积/通入空气体积）标
液体菌种菌龄ageofliquidspawn
1
DB12/T1012—2020
将蒸汽通入装有培养基的发酵罐中进行加热灭菌的过程。
3.7
摇瓶液体种liquidspawninshakeflask
装在玻璃三角瓶内在摇床上恒温振荡培养的液体菌种。
4
要求
4.1
生产场地
基本要求
4.1.1
环境应干净整洁、空气优良、通风良好、水源充足且符合GB5749生活饮用水卫生标准、排水畅通、
电源充足、交通便利。
4.1.2
环境卫生要求
应符合NY/T528食用菌菌种生产技术规程的规定。
4.2
生产设备设施
4.2.1
4.2.2
厂房设置和布局应符合NY/T528食用菌菌种生产技术规程要求。
发酵间应按照GB50073洁净厂房设计规范执行，地面应能防水、防腐蚀、防渗漏、防滑，易清
洗，排水坡度1.0%～1.5%，排水沟必须是圆弧式不锈钢的明沟；墙角为圆角，墙壁和天花板应能防潮、
防霉、防水、易清洗。
接种间应按照GB50073洁净厂房设计规范执行，液体菌种接种间设置缓冲间；入口处设置洗手、
消毒和干手设施；车间设封闭式废物桶，安装排气管道或者排风设备，门窗应设置防蚊蝇纱网。
主要仪器设备应配备水处理设备、液体菌种培养器、空气压缩机、空气过滤器、液体菌种接种
器、高压蒸汽灭菌锅、蒸汽锅炉、净化工作台、恒温摇床、恒温培养箱、冰箱、显微镜、磁力搅拌机、
磅秤、天平、酸度计等。在经常停电的地方应有自备电源（发电机）。
主要生产用具应配备玻璃三角瓶、接种器、试管、量杯量瓶、玻璃漏斗、定量定性滤纸、精密
选用高产、优质、抗逆性强、商品性好的食用菌品种，使用经省级以上农作物品种审定委员会
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见图1。
2
DB12/T1012—2020
摇瓶菌种←活化←母种
↓
原料→培养基配制→空消→实消→冷却→种子罐→发酵培养→液体菌种
↑
无菌空气
图1
液体菌种生产工艺流程
5.2
制备母种
容器
5.2.1
使用18mm×180mm或20mm×200mm玻璃试管,试管应保持清洁、干燥。
5.2.2
培养基
根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基，常用的配方参见附录A。
5.2.3
灭菌
高压蒸汽灭菌，在121℃，0.11MPa～0.12MPa的压力下，维持30min。
5.2.4
接种
在超净工作台上严格按无菌操作接种。接种完成后，在试管上注明菌种名称、接种时间。
根据食用菌菌种的生长要求，给予其适宜的培养温度22℃～28℃，保持空气相对湿度在65%～75%，
菌种应留样备查，留样的数量应以每个批次母种3支～5支。草菇在13℃～16℃贮存，其他种类母种
于4℃～6℃下贮存，贮存至该批菌种出第一潮菇。
每瓶装量为400ml，用通氧砂芯硅胶塞封口。
同5.2.3高压蒸汽灭菌法。
3
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2
的琼脂斜面母种3块～5块。
将灭菌后的培养基冷却至30℃以下进行接种，每瓶接入0.5cm
5.3.6
培养
将接种后的三角瓶放到摇床上进行振荡培养，根据食用菌品种的不同生长要求，给予其适宜的培养
温度22℃～28℃，保持空气相对湿度在65%～