大豆中异黄嗣含量的测定高效液相色谱法.pdf

ICS67.060

B23

中华人民共和国农业行业标准

NY/T174阶－2009

大豆中异黄嗣含量的测定

高效液相色谱法

DeterminationofisoflavonesinsoybeanbyHPLC

2009-04-23发布2009-05-20实施

中华人民共和国农业部发布

NY/T1740-2009

前

本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。

本标准起草单位：农业部作物品种资源监督检验测试中心、中国农业科学院作物科学研究所。

本标准主要起草人：李为喜、刘方、王述民、朱志华、刘三才。

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NY/T1740-2009

大豆中异黄嗣含量的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了利用高效液相色谱法对大豆中异黄酣化合物分离、检测的方法。

本标准适用于大豆籽粒中异黄隅（黄豆青、黄豆黄素营和染料水昔）含量的测定。单个异黄嗣化合

物的最低检出限为20mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单〈不包括堪误的内容〉或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备

GB/T5497粮食、油料检验水分测定法

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样中的异黄酣化合物经有机溶剂提取后，直接注入反相色谱柱，不同的异黄酣化合物在色谱柱上

先后流出，经紫外光谱检测后与标准样品对比，进行定性定量分析。

4试剂和溶液

本标准所用试剂在未注明其他要求时，均指符合相应国家标准的分析纯试剂。除非另有规定，仅使

用分析纯试剂。水，符合GB/T6682规定的一级水。本标准所述溶液如未指明溶剂，均为水溶液。

4.1甲醇：色谱纯。

4.2冰乙酸：色谱纯。

4.3甲醇溶液：80%(80+20），用甲醇（色谱纯）加水配制。

4.4甲醇溶液：50%(50+50），用甲醇（色谱纯）加水配制，过0.45µm微孔滤膜。

4.5氢氧化纳溶液：c(Na0H)=2mol/L，按GB/T601配制。

4.6标准品：黄豆昔（daidzin）、染料木昔（genistin）和黄豆黄素昔（glycitin），含量均大于95%。

4.7标准贮备液的配制：称取5mg黄豆昔、5mg染料木营、Smg黄豆黄素昔，精确至O.01mg，分别置

于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀释至刻度。单个贮备标准溶液的浓度分别为：黄豆昔100µg/mL，染

料木昔100µg/mL，黄豆黄素昔100µg/mL。

4.8混合标准液配制：分别吸取单个贮备标准溶液1mIJ置于同一个lOOmL容量瓶中，加入50%的甲

醇溶液稀释至刻度。

4.9标准丁－作液配制：使用前，将混合标准溶液用50%甲醇溶液（4.4）稀释成所需浓度的标准工作液，

绘制标准曲线。

5仪器和设备

5.1分析实验室常用仪器设备。

5.2高效液相色谱仪，附带紫外或二极管阵列检测器。

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5.3色谱柱：C1s反相柱