SN_T 3637-2013出口食品中异麦芽糖、塔格糖的测定 高效液相色谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3637-2013出口食品中异麦芽糖、塔格糖的测定高效液相色谱法Determination of isomaltose and tagatose in food for export-HPLC method2013-08-30 发布2014-03-01实施中华人民共和国发布W4008W315.2国家质量监督检验检疫总局余层查真伪 SN/T 3637—2013前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河北出人境检验检疫局。本标准主要起草人：马育松、窦彩云、郭春海、艾连峰、贾海涛、陈瑞春、段文仲。 SN/T 3637—2013出口食品中异麦芽糖、塔格糖的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了出口食品中异麦芽糖、塔格糖的高效液相色谱测定方法。本标准适用于果汁饮料、含乳饮料、蜂蜜、糖果、饼干、米粉、熏肉中异麦芽糖、塔格糖含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要样品中的异麦芽糖、塔格糖加水提取，提取液沉淀蛋白后以C1s柱净化或直接以C1s柱净化，高效液相色谱测定，外标法定量。4试剂与材料除另有说明外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1乙腈，色谱纯。4.2 乙酸锌。4.3亚铁氰化钾。4.4乙酸锌溶液（219 g/L）：称取219g乙酸锌（4.2)，加水溶解并稀释至1L4.5亚铁氰化钾溶液（106g/L）：称取106g亚铁氰化钾（4.3），加水溶解并稀释至1L。4.6标准物质：异麦芽糖（分子式 C12H22On,CAS号：499-40-1)、塔格糖（分子式CH12O。，CAS号：87-81-0)纯度大于或等于95%。4.7标准储备液：精确称取适量异麦芽糖、塔格糖标准物质（4.6），分别用水配制成50.0mg/mL的标准储备液，置于4℃冰箱中保存。4.8标准曲线系列：将标准储备液（4.7)用水逐级稀释成异麦芽糖浓度为 1.0 mg/mL、2.0 mg/mL、5.0 mg/mL、10.0 mg/mL、20.0 mg/mL,塔格糖浓度分别为 0.4 mg/mL、0.8 mg/mL、2.0 mg/mL、4.0mg/mL、8.0mg/mL的标准曲线溶液，临用前配制。4.9C1g固相萃取小柱,500mg,3mL。使用前依次用5mL甲醇和5mL 水条件化，保持柱体润湿。4.10 0.45 μm滤膜,水系。5仪器与设备5.1高效液相色谱仪：配有示差折光检测器。1 SN/T 3637-—20135.2分析天平：感量为0.01g,0.1 mg。5.3漩涡振荡器。5.4超声波提取器。5.5离心机（最大转速大于5000r/min）。5.6具塞塑料离心管,50 mL。5.7比色管,50 mL。6样品制备和保存6.1熏肉、糖果、饼干、米粉取样品中有代表性的样品约500g，用粉碎机或研磨器粉碎，装人洁净容器作为试样，密封并做好标识，于一18℃冰箱内保存。6.2蜂蜜、果汁饮料、含乳饮料取充分混匀的样品约500g，置于密闭的容器内，4℃冰箱内保存。6.3注意事项制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7 测定步骤7.1提取7.1.1熏肉、糖果、饼干、米粉称取试样约5g(精确到0.01g)于50mL塑料离心管中，加人25mL水，漩涡震荡1min，超声提取20 min，5000r/min离心10min，将上清液用滤纸过滤至50 mL比色管中，残渣再加人20 mL水重复提取一次，合并提取液并定容至 50 mL,待净化。7.1.2含乳饮料、蜂蜜、果汁饮料含乳饮料称取试样约5g（精确到0.01g)于50mL比色管中，加入40mL水，再加人2mL乙酸锌溶液（4.4）、2mL亚铁氰化钾溶液（4.5），摇匀，用水定容至50mL。转至离心管中于5000r/min离心10 min,取上清液待净化。蜂蜜和果汁饮料称取试样约5g(精确到0.01g)于50mL比色管中，加水溶解并定容至50mL，摇匀,待净化。7.2净化将待净化的提取液(7.1)取5 mL以不超过1mL/min 的流速通过 C1s小柱（4.9），弃去前 3mL，收集余下的流出液，经0.45μm滤膜(4.10)过滤，待液相色谱仪测定。7.3测定7.3.1 液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下：2 SN/T 3637-—2013色谱柱:NH²柱250 mmX4.6 mm(内径）,粒度5 μm,或相