禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及致病性研究.pdf

山东畜牧兽医 2017年第38卷 禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及致病性研究 王传春袁东方孙秋艳 李舫+ (山东畜牧兽医职业学院山东潍坊261061) 摘要禽大肠杆菌病是由禽致病性大肠杆菌所引起的严重危害养禽业健康发展的重要细菌性传染病之一。本试验对寿光 市某养殖场送检的具有典型大肠杆菌病的临床症状的15X病死鸡进行剖检，病理组织学观察，分离鉴定出禽致病性大肠 杆菌；并用分离纯化的细菌对7日龄的雏鸡进行注射，连续观察7d，研究其致病性及感染雏鸡发病特点，同时对死亡雏 鸡进行了系统的病理组织学观察，分析了大肠杆菌感染雏鸡的致病规律。为临床上雏鸡大肠杆茵病的诊断和防治提供理 论依据。 关键词禽致病性大肠杆菌分离鉴定致病性 中图分类号：$853．61+2文献标识码：A 文章编号：1007．1733(2017)03—0008．02 禽致病性大肠杆菌(Avain Escherichia． Pathogenic 菌的染色情况与形态。(2)生化试验：将分离的菌株接 coli，APEC)是引起鸡、火鸡及其他禽类局部或全身性大种于葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、，枸橼酸盐 肠杆菌病的病原，是严重危害养禽业健康发展的重要细 等微量糖发酵管，37*C恒温培养18～24h，观察结果。 菌性传染病之一…。近年来，随着养禽业向集约化、规模 1．7禽大肠杆菌致病性的研究30羽试验雏鸡随机分试 化方向发展，禽大肠杆菌病经常发生，对养禽业造成重 验组(A组)、对照组(B组)两组，取上述储备菌液(1×109个 大的经济损失【2圳。不同品种、不同日龄的鸡一年四季均 ／m1)分别接种A组15羽七日龄雏鸡，每只雏鸡于颈部采取 能感染此病，但以冬末春初和霉雨季节最为常见，20-45皮下注射3ml菌液。B组雏鸡分别在相同部位皮下接种3ml 日龄的肉鸡发病流行最严重，主要经鸡的呼吸道、消化 灭菌生理盐水。记录两组雏鸡初始体重，然后将其置于 道和种蛋等途径进行传播【5]。为了解APEC的致病性及感33。C左右灯光取暖的温室中，按照(89／只)集中供给全饲 染雏鸡的发病特点，本研究对潍坊市寿光市某养殖场送 料，全天候供水，每天上、下午各一次记录并拾取死亡 检的具有典型大肠杆菌病的临床症状的15只病、死鸡进 雏鸡个数，剖检，拍照，采取心脏、肝脏、脾脏、肺 行剖检，病理组织学观察，分离鉴定，并对7El龄的雏鸡 脏、肾脏用10％福尔马林固定48h以上留做病理切片制作 进行攻毒试验，对实验结果进行分析，为临床上雏鸡大 观察，同时每日称量残存雏鸡体重。饲养7d后，将剩余 肠杆菌病的诊断和防治提供理论依据。 存活雏鸡处死。 l材料与方法 2结果 1．1 病料来源 潍坊市寿光市某养殖场送检的15只病、 2．1 临床症状及剖检变化病鸡表现为精神沉郁、翅膀 死鸡。 下垂，呼吸困难等临床症状。剖检病死鸡嗉囊积食，肝 1．2 试剂 营养肉汤培养基、MAC(麦康凯)培养基、 肿大，胆囊扩张(图A)，可见胸腔有少量纤维素性渗出物 PC(普通营养琼脂)培养基、EMB(伊红美蓝)培养基、SS琼或卵黄样渗出物，卵黄吸收不良(图B)；肝脏淤血，脂肪 脂培养基均购白于北京陆桥技术股份有限公司。 变性呈土黄色肿大，胆囊扩张(图C)；腺胃浆膜面有点状 l-3试验动物购自山东某种禽孵化场的7日龄的雏鸡30 出血(图D)，肌胃外观没有明显病变。疑似禽致病性大肠 羽份。 杆菌侵袭。 1．4病理剖检及样本采集对送检的15只病死雏鸡进行 剖检，详细记录各个器官的病理变化，无菌采集病死鸡 的心、肝、脾、肺、肾等组织，一部分用于细菌分离培 养，一部分用4％多聚甲醛固定48h用于切片制作。 1．5 细菌的分离培养 以上病料在MAC上接种划线， 37。C恒温箱培养18h。观察菌落形态并选取单个粉红色典