环丙沙星单克隆抗体的制备及性质鉴定.pdf

Vol.26 No.1 科 技 通 报 第 卷第 期 26 1 Jan. 2010 年 月 BULLETIN OF SCIENCE AND TECHNOLOGY 2010 1 环丙沙星单克隆抗体的制备和性质鉴定 ， ， 1 2 1 3 1 3 1 2 顾 黎 ，孔 蕴 ，刘 围 ，郜海涛 ，郗日沫 ，王 鹏 （1. 山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室 济南 250100 ； 2. 国家糖工程技术研究中心 济南 250100 ； 3. 山东大学化学与化工学院 济南250100 ） 摘 要：为了制备抗环丙沙星单克隆抗体，首先采用碳二亚胺法合成了环丙沙星与载体蛋白偶联的免 疫抗原和包被抗原，免疫 小鼠，取效价最高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞 融合， 培养 BALB／ c SP2／ 0 HAT 基筛选，有限稀释法克隆化，获得 株稳定分泌抗环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株。 检测结果显 1 示，杂交瘤细胞染色体数目平均 条，培养上清的效价为 3 ，单抗腹水效价达 6 ， 102 1∶1.28×10 1∶1.024×10 IC50 为68.31 ng/mL ，属于IgM 型，轻链kappa ，CI-ELISA 法显示单抗对环丙沙星有高度的选择性，提示 获得的单抗可望用于环丙沙星残留物的免疫化学检测。 关键词：环丙沙星；药物残留；单克隆抗体 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Q819 A 1001-7119 2010 01-0072-05 Preparation and Characterization of Anti-ciprofloxacin Monoclonal Antibody