鸡干扰素基因的分子克隆与序列测定①.pdf

刘胜旺等　鸡干扰素基因的分子克隆与序列测定　第 1 期 ·45 · ·兽医免疫学· 鸡干扰素基因的分子克隆与序列测定① 刘胜旺 　陈洪岩 　刘思国 　孔宪刚 　卢景良 ( 哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 ,哈尔滨 150001) 中国图书分类号 　R85265 　　文献标识码 　A 　　文章编号 　1000484X( 2001) 摘 　要 　目的 :从接种新城疫 F48E9 病毒的La Sota 疫苗免疫鸡体外有丝分裂原刺激的脾淋巴细胞中克隆鸡干扰素基因。 方法 :应用逆转录多聚酶链式反应技术扩增 ,常规平端连接、转化及序列测定技术进行验证。结果 :研究表明克隆得到的基因 与国外报道的鸡胚成纤维细胞干扰素基因。结论 :鸡在该状态下其脾淋巴细胞表达鸡胚成纤维细胞干扰素 mRNA 。 关键词 　鸡干扰素基因 　分子克隆 　序列测定 Cloning and sequencing of cDNA encoding chicken interferon gene LIU ShengWang , CHEN HongYan , LIU SiGuo et al . National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology , Harbin 150001 ( ) ( ) Abstract 　Objective :To clone the gene of chicken interferon IFN from splenocytes of Newcastle disease virus NDV La Sota vaccinat ed chickens which then injected with NDVF48E9 strain. Methods :The techniques of RTPCR ,convenient ligation ,transformation and sequenc ing were used. Results :The sequence of cloned gene was just the same as the published chicken embry cells IFN.Conclusion :The chicken em ( ) bry cells IFN mRNA was expressed in splenocytes of Newcastle disease virus NDV La Sota vaccinated chickens which then injected with NDVF48E9 strain. Key words 　ChickenIFN 　Cloning 　Sequencing 　　1957 年 ,Issacs 等首先发现了病毒的干扰现象 , 了扩增 , 同时将克隆到的基因进行了序列测定。现 即病毒感染的细胞能产生一种因子 ,作用于其他细 将结果报告如下。 ( 胞 ,干扰病毒的复制 , 因而命名为干扰素 Interferon , 1 1 　材料与方法 IFN) 。根据其细胞来源、生化特性及生物学活性 ( α β 的差异 ,将其分为两大类型 : Ⅰ类 IFN 、IFN 、IFN 11 　实验动物 　12 日龄SPF 雏鸡由哈尔滨兽医研 ω τ αβ) ( γ) 2 ,3 。由于 究所实验动物中心提供。 和 IFN ,又称 IFN 和 Ⅱ类 IFN 它在调节机体体液免疫反应和细胞介导的免疫反