大鼠肝实质细胞原代培养模型的研究及其功能鉴定.pdf

# 743 # r r CN 34- 1206PR, ISSN 1009- 2501 http:PPwww . DrugChina. net 2005 Jul 10( 7) : 743- 746 大鼠肝实质细胞原代培养模型的研究及其功能鉴定 周星辉, 王丙力, 谭焕然 北京大 医 部基础医 院药理 系, 北京 100083 : 为肝细胞功能及相关的研究提供 一种 客观的简便的大鼠肝细胞原代培养模型, 并鉴定肝 , 细胞的功能: 在传统的两步灌流法的基础上 , 进行改良分离培养肝实质细胞 流式细胞术测定原 代肝细胞的细胞周期和细胞凋亡情况 SRB 法测定 , 不同培养基对原代肝细胞的生长和功能的影响 , : 分离得到的肝细胞成活率可达90% 以上, 纯度 可达95% 以上 流式细胞术结果表明原代肝细胞大 , 多处于G PG 期, 且基本无凋亡 SRB 法和白蛋白分 0 1 泌量检测结果显示, 低糖DMEM 组原代肝细胞生长 1 和白蛋白分泌功能在短期内( 1~ 5 d) 与高糖DMEM 组没有明显差异 RPMI 1640 组肝细胞的生长和功能 1. 1 SPF ( special pathogen free) Spra- 则明显低于前两组( P 0. 05) : 体外培养的 gue- Dawley , 150 ~ 200 g, 肝细胞活力和纯度均较高, 体外培养后细胞功能正 , : SCXK ( ) 2002- 常, 是一种实用的体外研究肝细胞良好的细胞 模 0001IV RPMI1640 DMEM ( 4 . 5 型 g#L- 1 D- ) DMEM ( 1. 0 g #L- 1 D- 大鼠 肝细胞 原代培养 细胞模型 肿瘤 ) Invitrogen ( ) : R965. 1 : A : 1009-2501( 2005) 07- 0743- 04 1. 2 0. 6% , , , , , , , 5 , ml#min- 1 500 ml 37 e ( 142 mmol [ 1] , NaCl6. 7