大鼠血管外膜成纤维细胞的原代培养及生物学行为研究.pdf

第14卷第10期 中国实验方剂学杂志 V01．14，No．10 2008年10月 ChineseJournalof TraditionalMedicalFormulae Oct．．2008 Experimental 大鼠血管外膜成纤维细胞的原代培养 及生物学行为研究 鹿燕敏，李兰芳，霍海如，谭余庆。 (中国中医科学院中药研究所，北京 100700) [摘要] 目的：建立大鼠血管外膜成纤维细胞的体外分离、培养及鉴定的方法，并对其生物学特征进行观察。方法：通过 37℃，5％C02，饱和湿度下培养。倒置显微镜下观察成纤维细胞形态，进行细胞中间丝蛋白的免疫化学鉴定，并绘制细胞生长 曲线。结果：成纤维细胞能够迅速从组织块长出并增殖，波形蛋白免疫细胞化学染色为阳性，结蛋白及第Ⅷ因子染色为阴性， 细胞在第(2～4)天进入指数生长期。结论：该方法所获得的血管外膜成纤维细胞可在体外稳定培养，为在细胞水平研究血管 再狭窄机制提供了充足可靠的靶细胞模型。 [关键词]成纤维细胞；细胞培养；细胞鉴定；生物特征 [中图分类号]Q26 【文献标识码]B [文章编号】 1005-9903(2008)10—0061．03 CultureRat AdventitialFibroblastsand Primary Vascular Behaviour Biological Study LUEarl,-min，LI Hai-Ⅲ，TAN Lan-fang，HUO Yu-qing+ (InstituteChineseMateriaMedica，ChinaChineseMedical 100700，China) of Academyof Sciences，Beijing themethodof andidentificationofratvascularadventitial [Abstract]0bjective：Toexplore isolation，cultivation fibroblastsin observeits behaviour．Methods：Dulbecco’Smodified vitro，and biological Eagle’S thebasicculture with20％fetalbovineserum for thoracicaortaladventitia medium，beingsupplemented usingculturing tissue with10％fetalbovineserum for cells．nefibroblastswereincubateat37℃ pieces．and usingculturingpassage in intheincubator．Growth were a humidified of5％CO，and95％air