黑曲霉_葡萄糖苷酶的筛选_克隆及表达.pdf

2009 15 3 ): 423~426 2009-06-25 应用与环境生物学报 ， ( Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2009.00423 * 黑曲霉β-葡萄糖苷酶的筛选、克隆及表达 1, 2 1 1 2 3** 1** 唐德芳 裴小琼 李晓璐 胡 承 陈 军 吴中柳 1 ( 中国科学院成都生物研究所 成都 610041) (2 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室 成都 610041) (3成都医学院科研实验中心 成都 610083) 摘 要 从曲霉属 10株试验菌中筛选得到一株产β-葡萄糖苷酶活性较高的黑曲霉FTA-008. 该菌株在适宜的培养条件 下，β-葡萄糖苷酶的最高活性达2.89 U/mL ，适宜产酶周期为3 d. 通过设计特异引物，以该菌株的总RNA为模板，采用 RT-PCR技术获得大小为2 511 bp的cDNA片段，该序列与GenBank中AJ132386 的β-葡萄糖苷酶序列相比，氨基酸序列同 源性达96.8%. 经毕赤酵母表达，β-葡萄糖苷酶比活力达7.85 U/mg. 图3 表 1 参 13 关键词 黑曲霉；β-葡萄糖苷酶；克隆；RT-PCR ；毕赤酵母；表达 CLC Q936 + Q556.2 Screening, Cloning and Expression of Aspergillus niger β-glucosidase* 1, 2 1 1 2 3** 1** TANG Defang , PEI Xiaoqiong , LI Xiaolu , HU Cheng , CHEN Jun WU Zhongliu 1 ( Chengdu Institute of Biology, Chinese Academy of Sciences, Chengdu 610041, China) (2MOE Laboratory of Bioresource and Environment, College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610041, China) (3Scientifi c Research Center, Chengdu Medical College, Chengdu 610083, China) Abstract From the 10 strains of Aspergillus , the strain A. niger FTA-008 was selected and it