人IL-8 Elisa试剂盒.pdf
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人 IL-8 定量分析酶联免疫检测试剂盒
本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的 IL-8 浓度。使用前请仔细阅读
说明书并检查试剂组分是否完整, 如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系,我们将提供力所能及的帮助。
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IL-8简介:
IL-8 是由巨噬细胞产生的单核因子,是趋化因子家族 C-X-C 亚族(α亚族)中的一员,对中性粒细胞、T 淋巴
细胞、嗜碱性粒细胞具有趋化作用,能够吸附中性粒细胞,嗜碱性粒细胞和 T 细胞,但是单核细胞除外。人的 IL-8 cDNA
序列表明有 99 个氨基酸残基。经过剪节掉 22 个个残基后,形成成熟的具有 77 个氨基酸的蛋白。IL-8 还能够调节 T
淋巴细胞、B 淋巴细胞成熟分化,在炎症反应、免疫调节中起重要作用,并且研究表明 IL-8 还具有促进血管生成的
作用。IL-8 在人体内存在两种主要形式,一种是来源于单核细胞含 72 个氨基酸的多肽,另一种是来源于内皮细胞含
77 个氨基酸的多肽。72aa 比 77aa 的 IL-8 具有更高的趋化活性,而 77aa 的 IL-8 具有诱导白血病细胞凋亡的功能,
其位于 N 端的五肽序列已被确定是 IL-8 具有诱导凋亡功能的活性部位。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-8 的浓度。IL-8 捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或
参考品时,其中的IL-8 会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人IL-8 抗
体后,抗人IL-8 抗体与IL-8 接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣
根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其
它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在IL-8 将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶
会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,IL-8 浓度
与OD 值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-8 浓度。
450
人定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:
组分 规格
预包被板 12条 或 6条
样本分析缓冲液 1瓶5ml/3 ml
标准品稀释液 10ml/5ml
标准品 2/1(冻干)
生物素化抗体 1瓶10ml/5ml
HRP连接的酶结合物 1瓶10ml/5ml
浓缩洗涤液 20× 30ml/瓶
TMB底物 1瓶10ml/5 ml
终止液 1瓶5ml/3 ml
封板胶纸 3/2张
说明书 1份
标本收集:
1.标本的收集请按下列流程进行操作:
A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;
B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集;
D. 若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
BeijingBLKW BiotechnologyCo.,Ltd. Tel:01052872342 blkwbio@
3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;
4.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
注:正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:
1.试剂盒请保存在2~8℃。
2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶,请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
3.若标准品复溶后
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