人白细胞介素6（IL-6）ELISA试剂盒说明书-赛洛菲生物.pdf

酶联免疫吸附测试EnzymeLinkedImmunosorbentAssay

人白细胞介素6（IL-6）酶联免疫(ELISA)

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用，不得用于临床诊断规格：48T/96T

实验目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中白细胞介素6（IL-6）的含量。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素6（IL-6）水平。用纯化的人白细胞介素6

（IL-6）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入人白细胞介素6（IL-6），

再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人白

细胞介素6（IL-6）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样

品中人白细胞介素6（IL-6）含量。

试剂盒组成：

试剂盒组成48孔配置96孔配置保存

说明书1份1份

封板膜2片2片

密封袋1个1个

酶标包被板1×481×962-8℃保存

标准品0.3ml×6管0.3ml×6管2-8℃保存

酶标试剂5ml×1瓶10ml×1瓶2-8℃保存

样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

20×浓缩洗涤液15ml×1瓶25ml×1瓶2-8℃保存

注：标准品浓度依次为：48、24、12、6、3、0pg/mL.

样本处理及要求：

1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，

保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左

右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有

沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万

/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/

分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本

融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。

6.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧