doc_人CD40分子CD40 酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒).doc

PAGE  PAGE 5 仅供科研使用，不得用于临床诊断。 仅供科研使用，不得用于临床检验。 人CD40分子（CD40 ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）说明书 黄石市艾恩斯生物科技有限公司 【产品名称】 通用名称：人CD40分子（CD40 ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒） 英文名称：Human Cluster of differentiation 40（CD40 ）ELISA KIT 【包装规格】 48人份/盒，96人份/盒 【预期用途】 仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人CD40分子（CD40 ）的浓度。 【检验原理】 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗人CD40分子（CD40 ）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人CD40分子（CD40 ）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗人CD40分子（CD40 ）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人CD40分子（CD40 ）的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中人CD40分子（CD40 ）的浓度。 【主要组成成分】 主要成分 组分数量主要成分校准品0.5ml/管*6管抗原配制的6个浓度标准品包被微孔板96T预包被固相抗体HRP标记抗体6mLHRP标记的检测抗体底物液A6mL过氧化脲工作液底物液B6mLTMB工作液20×浓缩洗涤液30mL含0.15%Tween20的PBS说明书1份--自封袋1个--不干胶2片--校准品检测范围：15.6-1000pg/ml。校准品已经通过测试，结果表明HBs抗原阴性，HIV1、HIV2和HCV抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。 需要但未提供的材料及耗材 1、酶标仪 2、精密移液器及一次性吸头 3、蒸馏水 4、洗瓶或者自动洗板机 5、37℃水浴锅或恒温箱 6、500ml量筒 7、无粉一次性乳胶手套 【储存条件及有效期】 1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。 2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。 3、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和HRP标记抗体，有效期为14天，其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。 【适用仪器】 半自动的酶标仪，如Thermo MK3，或者国产酶标仪。 【样本要求】 样本类型和采集 以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。 1、细胞培养上清：4000rpm条件下离心20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反复冻融。 2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm条件下离心20min，小心地分离出血清，保存在- 20℃以下，避免反复冻融。 3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下，离心20分钟取上清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。 样本保存和稳定性 样本在2-8℃条件下，可以储存72h，或者在- 20℃储存6个月。样本收集后，不是一次检测完，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分解冻。 【检验方法】 试剂准备 1、使用前，所有的组分都要至少复温30min，确保充分复温到室温。 2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。 3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1体积充分混合，混合后15分钟内使用。 操作程序 1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。 2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。 3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。 4、设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，样本孔加待测样本50μL，空白孔不加。 5、除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。 6、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 7、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干。 8、如此