微生物实训教案微生物实训教案.doc

苏州农业职业技术学院教案 教师姓名 刘文如 授课时数 6 授课形式 实训 授课班级 农业环保11-1 授课日期 节 次 环境监测11-1 授课日期 节 次 环境工程11-1 授课日期 节 次 环境监测11-2 授课日期 节 次 城环11-1 授课日期 节 次 授课章节 名 称 实训一　马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配制 教学目标 掌握马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配制步骤 了解马铃薯葡萄糖琼脂培养基的适用菌种 教学重点 马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配制过程 教学难点 无 更新、补充及删节 内 容 无 使用教具 微生物实验室 课外作业 实验报告；每组上交一份培养基 课后体会 授课主要内容或板书设计 实训一、马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配制 一、实训目的： 掌握马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar） 苏州农业职业技术学院教案 教师姓名 刘文如 授课时数 6 授课形式 实训 授课班级 农业环保11-1 授课日期 节 次 环境监测11-1 授课日期 节 次 环境工程11-1 授课日期 节 次 环境监测11-2 授课日期 节 次 城环11-1 授课日期 节 次 授课章节 名 称 实训二　牛肉膏蛋白胨培养基的配制 教学目标 掌握牛肉膏蛋白胨培养基的配制步骤 了解牛肉膏蛋白胨培养基的适用菌种 教学重点 牛肉膏蛋白胨培养基的配制步骤 教学难点 无 更新、补充及删节 内 容 牛肉膏蛋白胨培养基的适用菌种 使用教具 微生物实验室 课外作业 实验报告，每组上交一份培养基 课后体会 授课主要内容或板书设计 实训二、牛肉膏蛋白胨培养基的配制 一、实训目的： 掌握牛肉膏蛋白胨（Nutrient? Agar）培养基的配制原理和过程。 二、实训材料及用具 1、材料与试剂：牛肉膏1.5g、蛋白胨5g、琼脂10g、Nacl 2.5g、H2O 500ml、pH 7.4～7.6。 1mol/lNaOH、1mol/lHCl。 2、仪器与用品：天平、高压蒸汽灭菌锅、搪瓷杯、量杯、玻棒、锥形瓶、药匙、称量纸、pH精密试纸（pH值5.0～9.0）、电炉、记号笔、棉花、纱布、线绳、报纸等。 三、实训步骤 1、称量及溶化 按培养基配方逐一称取牛肉膏蛋白胨等营养成分依次加入搪瓷杯中，再加定量无菌水，用玻棒搅匀，加热溶解，待全部溶解后，?足失水。注意：在加热溶解时要不断搅拌，避免琼脂糊底烧焦。 2、调节pH值　用精密pH试纸测培养基的pH值，按pH值的要求用1mol/lNaOH或1mol/lHCl调整到所需的pH值，边加边搅拌，并随时有pH试纸测试其pH值。 3、分装：将培养基分装于3个锥形瓶中（注意防止培养基沾污瓶口，避免浸湿棉塞引起杂菌污染）、加塞、包扎。 4、高压蒸汽灭菌 0.1MPa灭菌20min。 5、将已经灭菌的培养基放在370C恒温箱中培养24h，观察灭菌是否彻底。 四、作业 每组上交一份已经灭菌的马铃薯琼脂培养基。 注：牛肉膏蛋白胨培养基用于食品、奶制品及水中细菌总数的测定。 授课主要内容或板书设计 实训三、干热灭菌和湿热灭菌 一、实训目的　 掌握干热灭菌和湿热灭菌的原理和方法 二、实训内容 1、干热灭菌：干热灭菌主要指火焰灼烧法和干热空气灭菌法。将已包装好的培养皿、移液管、试管及其他玻璃器皿放入恒温箱中，关好恒温箱门，打开电源，将温度设定为1600C，等温度上升到1600C后，维持2h，然后把恒温箱的调节旋钮调回零处，等温度降到500C左右，才可将物品取出。　 注意：灭菌时温度不得超过1700C，以免包装纸烧焦；灭菌好的器皿就保存好，切勿弄破包装纸，否则会染菌。 2、湿热灭菌： （1）高压蒸汽灭菌：此法是将物品放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内灭菌。在密闭的系统中，蒸汽压力升高，温度也随着升高，加之热蒸汽穿透力强，可迅速引起蛋白质凝固变性，从而起到杀菌的目的。目前高压蒸汽灭菌已成为湿热灭菌法中效果最佳、应用最广的一种灭菌方法，适用于培养基、工作服、生理盐水等缓冲溶液玻璃器皿等的灭菌。常采用0.105MPa气压、1210C灭菌15～30min，时间的长短可根据灭菌物品的种类和数量的不同而有所变化，对体积大、热传导性差的物品，加热时间应当适当长延长。 过程：a、向高压灭菌锅内加水到适当水位；b、将欲灭菌的培养基放入锅内，盖严；c、打开放气阀，关闭安全阀，将压力旋钮调到0.1MPa，定时器调到20min；d、打开电源加热，待锅内冷气都排出后，关闭放气阀； （2）常压蒸汽灭菌：将灭菌培养基放入灭菌器内，每天加热1000C，30min，连续3天，第一天加热后，其中的营养体被杀死，将培养基取出放在3