SN／T 2301-2009_国境口岸登革病毒的实时荧光RT-PCR快速检测方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ／ — 犛犖犜２３０１ ２００９ 国境口岸登革病毒的实时荧光犚犜犘犆犚 快速检测方法 ㅤㅤㅤㅤ行业标准 犚犪犻犱犾犱犲狋犲犮狋犻狀 犿犲狋犺狅犱犳狅狉犱犲狀狌犲狏犻狉狌狊犫 狉犲犪犾狋犻犿犲犳犾狌狅狉犲狊犮犲狀犮犲犚犜犘犆犚 狆 狔 犵 犵 狔 犪狋犳狉狅狀狋犻犲狉 狅狉狋 狆 ２００９０７０７发布 ２０１００１１６实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 ／ — 犛犖犜２３０１ ２００９ 国境口岸登革病毒的实时荧光犚犜犘犆犚 快速检测方法 １ 范围 　 本标准适用于国境口岸入出境人或蚊类携带登革病毒的实时荧光 ＲＴＰＣＲ快速检测，包括检测对 象、标本采集和处理，检测程序，结果判定及报告。 本标准适用于国境口岸入出境人员或蚊类携带登革病毒的实验室检测。 ２ 规范性引用文件 　 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 人间传染的病原微生物名录（卫生部 ２００６年） ３ 术语和定义 　 下列术语和定义适用于本标准。 ３．１ ㅤㅤㅤㅤ行业标准 登革病毒 犱犲狀狌犲狏犻狉狌狊 　 犵 登革病毒属黄病毒科黄病毒属，包括 、 、 、 四种血清型，是有包膜的单股正链 ＲＮＡ病毒。 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 登革病毒可感染人，并引起登革热，严重者甚至可引起登革出血热或登革休克综合征。埃及伊蚊和白纹 伊蚊是登革病毒的主要传播媒介。 ３．２ 实时荧光犚犜犘犆犚 狉犲犪犾狋犻犿犲犳犾狌狅狉犲狊犮犲狀犮犲犚犜犘犆犚 　 实时荧光 ＲＴＰＣＲ方法有多种，本标准采用的是 犜犪Ｍａｎ水解探针法，其原理是在常规 ＲＴＰＣＲ 狇 的基础上，加入一条特异性的荧光探针，该探针为一段寡核苷酸，两端分别标记一个荧光报告基团和一 个荧光淬灭基团，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收， 扩增时，利用 酶的 ＰＣＲ 犜犪狇 ’ ’外切酶活性将探针酶切水解，使荧光报告基团和荧光淬灭基团分离，从而荧光监测系统可以接收 ５３ 到荧光信号，即每扩增一条ＤＮＡ链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的积累与 ＰＣＲ产物形成 完全同步。 ４ 缩略语 　 下列缩略语适用于本标准。 ４．１ 犚犜犘犆犚 狉犲狏犲狉狊犲狋狉