SN_T 5098-2019国境口岸人冠状病毒NL63和HKU1实时荧光RT-PCR检测方法.pdf

ICS 11.020C 62SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5098—2019国境口岸人冠状病毒NL63和HKU1实时荧光 RT-PCR 检测方法Detection method for human coronavirus NL63 and human coronavirusHKU1 by fluorescence RT-PCR at frontier port2019-09-03 发布2020-03-01实施中国世出中华人民共和国海关总署发布HG944440004260，刮开涂层激活密码 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准国境口岸人冠状病毒 NL63和 HKU1实时荧光RT-PCR检测方法SN/T 5098—2019*中国海关出版社有限公司出版发行北京市朝阳区东四环南路甲1号（100023)编辑部：(0107509网址 /book中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本880×12301/16印张 0.5　字数 14千字2020年3月第一版　2020年3月第一次印刷印数 1—500*书号：155175·200 SN/T 5098—2019前言本标准按照GB/T 1.1一2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳海关、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国成都海关、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：刘胜牙、朱玉兰、石莹、胡孔新、谢聪贤、徐云庆、张树平、董瑞玲、李东晓、刘君。 SN/T 5098—2019国境口岸人冠状病毒NL63和HKU1实时荧光 RT-PCR检测方法1范围本标准规定了国境口岸人出境人员携带人冠状病毒NL63和HKU1的实时荧光RT-PCR检测方法，包括标本的采集、运输、保存和处理、检测、结果判定和报告。本标准适用于国境口岸人出境人员携带人冠状病毒 NL63和 HKU1的实时荧光 RT-PCR检测方法。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB19489　实验室　生物安全通用要求WS/T 230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用WS233病原微生物实验室生物安全通用准则可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定(中华人民共和国卫生部令第45号)人间传染的病原微生物菌(毒)种保藏机构管理办法(中华人民共和国卫生部令第68号)3　术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1人冠状病毒 NL63 human coronavirus NL63; HCoV-NL63属于冠状病毒科冠状病毒属 α类冠状病毒。HCoV-NL63 在形态上与其他冠状病毒属的病毒-致，颗粒呈球形,直径在 120 nm～160 nm。HCoV-NL63属于单股正链RNA病毒，其基因组有27533个核苷酸；基因组 5端2/3的区域由开放读码框组成，编码复制酶多集蛋白;其3端的1/3区域编码表面纤突蛋白、膜蛋白、小膜蛋白及核衣壳蛋白 4个结构蛋白;其各基因排列为 5-1a-1b-S-ORF3-E-M-N-3。3.2人冠状病毒 HKU1human coronavirus HKU1; HCoV-HKU1属于冠状病毒科冠状病毒属 β类冠状病毒。HCoV-HKU1 在形态上与其他冠状病毒属的病毒-致，颗粒呈球形,直径在120 nm～160 nm。HCoV-HKU1属于单股正链RNA 病毒,其基因组有29 926个核苷酸;2个开放阅读框ORF1a和ORF1b约占 RNA全长 2/3,组成编码聚合酶的基因，其 3端的1/3 区域编码血凝素-酯酶蛋白(HE)及表面纤突蛋白、膜蛋白、小膜蛋白和核衣壳蛋白 4个结构蛋白;其各基因排列为 5’-1a-1b-HE-S-E-M-N-3’。1 SN/T 5098-20194缩略语下列缩略语适用于本文件。FAM:6-羧基荧光素(6-carboxy-fluorescein)。HEX:六氯-6-甲基荧光素(Hex-achloro-6-carbaxy fluorescein)。5生物安全和 PCR防污染要求5.1个人防护遵循GB19489。5.2实验室遵循GB19489和WS 233对生物安全2级(BSL-2)实验室的生物安全要求。5.3实验中产生的废弃物品遵照GB19489对废弃物的处理要求进行无害化处理。5.4疑似人感染HCoV-NL63和HCoV-HKU1病毒的材料的包装及转运应符合《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》。5.5PCR防污染措施按WS/T230的规定执行。6实验仪器设备6.1实时荧光定量PCR仪。6.2超净工作台。6.3生物安全柜。6.