4.动物细胞培养过程.ppt

明确学习目标 简述动物细胞的培养过程 举例说出细胞融合和单克隆抗体的制备 关注克隆技术的伦理问题 重点、难点、考点 动物细胞的培养 核移植与体细胞克隆 单克隆抗体的制备 问题导学 动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境： （添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以便清除代谢产物。） 2、营养物质(区分天然培养基与合成培养基) （无机盐、葡萄糖、氨基酸、核酸、维生素、动物血清等。） 3、温度和pH： 37℃, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 动物细胞生长特性： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）； 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性； 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。 小结基本概念 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1 代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分 装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 测试一下 1、在动物细胞培养过程中，出现遗传物质改变的细胞是（ ） A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞 2、下列属于动物细胞培养与植物细胞培养区别的是（ ） A．培养基成分不同 B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株 高度分化的植物组织能表达全能性，但动物细胞与植物细胞不同，动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。因此，目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物，实际是通过核移植来实现的。 动物体细胞核移植概念: 　　将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新胚胎最终发育成动物个体。 　　用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 思考题 4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？ 布置作业 复习细胞培养过程及克隆动物过程 学案后的【巩固练习】 预习细胞融合与单克隆抗体的制备 第二课时 细胞融合 单克隆抗体的制备 概念：（略） 过程 4、原理 细胞膜的流动性 5、最有价值的应用 制备单克隆抗体 3、过程 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 PEG 杂交细胞 细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核 显微镜下细胞融合过程 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 ４、植物、动物细胞融合的比较 一、何谓单克隆抗体？ 只针对某一抗原决定簇的抗体分子称为单克隆抗体。 * 克隆羊“ 多利 ” 新华网2010.12.3.消息 克隆羊多利重生 这4只克隆羊在遗传上与多莉毫无差异。多莉诞生于14年前，是第一个使用成熟细胞克隆的哺乳动物。　　克隆羊多莉(Dolly)已经获得“重生”。最初进行此项克隆研究的英国科学家又培育出4只克隆羊，被形象地称之为“Dollies”(多莉的复数)。它们是多莉的复制品，在遗传上与多莉丝毫不差，多莉在7年前离开这个世界。 1、克隆羊“多利”的重生，采用的是什么技术？ 细胞工程技术 2、动物细胞工程技术到底是干啥的？（定义） 在细胞生物学和分子生物学理论指导下，根据人类的需要一方面深入探索并改造生物的遗传特性，另一方面应用工程技术手段，大量培养细胞。 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体制备 体细胞克隆 细胞核移植 动物细胞工程技术 动物细胞工程的基础 范畴 动物细胞和组织培养 在体外模拟动物体内环境，将动物体细胞或组织，在无菌、温度适宜和营养充足条件下培养，使其继续生长、增值并维持原有结构和功能的技术。 讨论 1、动物细胞培养的原理是什么？ 2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并解释原因。 3、组织分散成单个细胞的方法是什么？其理论依据是什么？ 4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件？ 3.动物细胞培养过程： 用胰蛋白酶等处理动物组织，形成分散的悬浮细胞。动物细胞培养适宜的pH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 说明：分散成单个动物细胞（细胞培养） 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触