2.动物细胞培养的过程.ppt

2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 动物细胞常用的技术手段 ？ 动物细胞工程： 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体等  1.概念 从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 2.动物细胞培养的过程: 培养器皿 探究 探究 动物细胞生长特性： 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁 上，称为细胞贴壁。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面 相互接触时，细胞就会停止 分裂增殖的现象 原代培养 (primary culture) 定义：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。把第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。 传代培养 (subculture) 定义：当原代培养的细胞生长停止，这时如果要使细胞继续生长，就要及时用胰蛋白酶等，使细胞从瓶壁上解离下来，然后加入新的培养液，将细胞分离稀释，并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内，这个过程称传代培养 探究： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、 动物血清、血浆等。） 3、温度和PH 36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。 4、气体环境：O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 小结 一、动物细胞培养 1、概念 2、过程 3、条件 4、应用 旁栏思考 1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 2.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 动物核移植： 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 知识结构 动物细胞培养 和核移植技术 动物细胞培养 细胞培养的应用和概念 细胞培养的过程 细胞培养的条件 细胞培养技术的应用 动物体细胞核移植技术和克隆动物 核移植技术和克隆动物的概念 体细胞核移植技术的过程 体细胞核移植技术的应用前景 体细胞核移植技术存在的问题 * * 选修3 现代生物科技专题 专题2细胞工程 2.2动物细胞工程 教学目标 重点难点 问题探讨 教学过程 知识结构 教学反馈 课后习题 教学参考 教学目标 简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 植物组织培养, 植物体细胞杂交 问题探讨 其他动物细胞工程技术的基础。 原理：细胞增殖 2.过程 阅读P44-46相关内容，分析以下关键词的含义。 转入培养液中进行原代培养 1、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？ 2、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 3、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。 即：传代培养 4、如何理解原代培养和传代培养？ 5、传代培养的细胞都能一直传代下去吗？ 6、有些为何能一直传下去吗？ 7、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？ 8、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养 不都能 发生突变，朝着癌细胞方向发展 不是 保存10代以内的细胞，因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分遗传物质发生改变，发生突变向癌细胞方向发展。 过程：从动物机体中取出组织? 剪碎 ? 加胰蛋白酶? 细胞游离 ? 加培养液 ? 将细胞接种到培养瓶内 ? 培养（1—2天换一次培养液）? 细胞贴壁生长?长成单层细胞 多细胞