第七版医学免疫-第四章-抗体技巧.ppt

医 学 免 疫 学 （Medical Immunology) 2011级全科专业本科课程 第四章 免疫球蛋白和抗体 抗体和免疫球蛋白的基本概念 免疫球蛋白的结构（教学重点） 免疫球蛋白的异质性 免疫球蛋白的功能（教学重点） 各类免疫球蛋白的特点与功能（教学重点） 抗体的制备 Ab和Ig的基本概念 抗体的发现和研究历史： 1889年：绿脓杆菌 感染 动物血清 随后在免疫动物血清又相继发现： 溶菌素、沉淀素 等特异性成分 1930年： 血清蛋白电泳图谱显示： 关于抗体和免疫球蛋白基本概念 抗体 = 是介导体液免疫的重要效应分子，是B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白。（主要在g -球蛋白） 抗体是B细胞接受抗原刺激后产生的 Ag 关于抗体和免疫球蛋白基本概念 1964年WHO 的命名规定： 凡具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白（Ig） 第一节、Ig的结构 一、基本结构（单体结构） （一）结构组成－重链和轻链 重链（450~550aa) 根据氨基酸组成及序列差异分为以下五类, 分别称： 重链类型： g a d m e (链) （二）结构特点-可变区和恒定区 一、Ig基本结构 （二）结构特点-可变区和恒定区 V区的超变区（HVR） 一、Ig基本结构 （三）铰链区： （四）免疫球蛋白的功能区/结构域（domain) 第一节 Ig的结构 二、免疫球蛋白的其他成分 J链和分泌片（SP） 第一节、Ig的结构 三、免疫球蛋白的水解片段 第一节、Ig的结构 二、免疫球蛋白的水解片段 第二节 Ig的免疫原性（血清型）和异质性 一 免疫球蛋白的类和型 第二节 Ig的免疫原性（血清型）和异质性 免疫球蛋白针对自然界种类繁多的抗原，产生相应种类的特异性抗体， 种类极多， 造成抗体的多样性/异质性。 第二节 Ig的免疫原性（血清型）和异质性 1. 同种型(isotype)：（=种属特异性） 同一种系所有个体的Ig都含有的抗原决定簇，但与其它物种的有差别。 第三节、免疫球蛋白的功能 一、Ig V区的功能 第三节、免疫球蛋白的功能 （二） 结合Fc受体(FcR)－亲细胞性: 1. 调理吞噬作用 IgG-CH3与巨噬细胞FcγR结合； 2. 启动 抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 （ADCC） 3. 介导过敏反应 (IgE) ； IgE-CH4与肥大细胞上FcεR结合。导致脱颗粒，引起 I 型超敏反应。 第三节、免疫球蛋白的功能 （三） 选择性传递－通过胎盘和黏膜 IgG-CH2 穿过胎盘； IgA-CH3 穿过粘膜 第四节、各类Ig的结构和功能特点 一. IgG 1. 含量最多，占血清中Ig的70~80%； 2. 分布广，血液内外各占50%； 3. 抗感染作用最强（抗菌，抗病毒，抗毒素） ————（抗感染免疫的“主力部队”） 4. 感染后, 产生迟，维持久（迟来迟去）； 5. 能激活补体； 6. 能与某些细胞结合； 7. 唯一能通过胎盘的Ig。 二. IgM 二. IgM 1. 五聚体，分子量最大； 主要分布在血管内，有预防菌血症，败血症作用 不能通过胎盘 2. 感染后, 出现早，维持短（早来早去），可用于感染的早期诊断； ————（抗感染免疫的“先锋部队”） 3. 个体发育时最早(胎龄20周)合成的Ig； 新生儿脐血IgM升高提示宫内感染。 4. 激活补体的活性最强。 三. IgA 和 SIgA 三. IgA 和 SIgA 1. 有血清型（单体）和分泌型（双聚体）SIgA 2. SIgA分布在各种外分泌液中: （初乳，唾液，以及呼吸道、消化道和泌尿生殖分泌液） 在黏膜组织有局部抗感染免疫作用 ——（抗感染免疫的“边防部队”） 四. IgE 1. 正常人血清中含量最少 —(寄生虫感染、变态反应时升高) 2. 亲细胞性抗体--与肥大细胞/嗜碱性粒细胞结合 —可引起过敏反应（I型超敏反应） 五. IgD 1. 主要功能是表达在B细胞的表面，作为B细胞抗原受体（BCR），与B细胞分化有关； 2. 在血清中的功能不明确。 第五节、人工制备抗体 人工制备的抗体可分为： 多克隆抗体（抗血清，或从抗血清提取制备） 单克隆抗体（利用杂交瘤技术制备） 第五节、人工制备抗体 1.多克隆抗体(polyclonal antibody