食品中过敏原成分环介导等温扩增（LAMP）检测方法 第14部分：花生（编制说明）.doc

食品中过敏原成分环介导等温扩增（LAMP）检测方法第8部分：花生 　编制说明 1 基本信息 1.1 标准草案名称 中文 食品中过敏原成分环介导等温扩增（LAMP） 检测方法 第8部分：花生 英文 Loop-mediated isothermal amplification detection method for allergen components in food Part 8:Peanut 1.2 与国际标准和国外先进标准一致程度情况 等同 修改 非等效 标准号 / 英文名称 / 中文名称 / 1.3 任务来源 批准立项的文件名称和文件号 计划编号 1.4 制（修）订情况 制订√ 修订 替代的标准编号 / 1.5 起止时间 2012年01月～2013年12月 1.6 起草单位 中国检验检疫科学院；山东出入境检验检疫局 1.7 起草人 刘彩霞、高宏伟、孙敏、龚方、陈颖、吴亚君、韩建勋、黄文胜、邓婷婷 1.8 专业类别 1、食品（化妆品）检验√；2、卫生检疫；3、动物检疫；4、植物检疫； 5、纺织产品检验；6、轻工产品检验；7、机电产品检验；8、化工、矿产品和金属材料检验；9、管理；10、鉴定；11包装及危险化学品 1.9 标准体系表代码 1.10 调整情况 2 背景情况 2.1 目的、意义 花生是我国主要油料作物和经济作物之一，油料总产居第一位。花生营养丰富，花生种子可以炒、炸、捣碎磨酱，做花生糖、花生酥等糖果、糕点、饮料等，是100多种食品的重要原料。同时，花生种子蛋白是重要的食品过敏原之一。超过敏病人摄入100 μg花生蛋白就可有道花生过敏反应，有的会引起致命性的休克并危及生命。据报道，现在美国和英国有59%的食物过敏是由花生过敏原引起的，占到了第一位。在亚洲一些的国家和一些地方，花生是食品里面引起儿童食物过敏的主要原因， 吃了很少量的花生过敏原就可能引起过敏反应如肠胃不舒服、过敏性皮炎等疾病。Assemet等研究表明，食品过敏人群中有30%的人对花生过敏，中国协和医科大学变态反应科通过对就诊人群的调查表明，仅北京地区就有约4%的食品过敏患者对花生过敏。相对于其他过敏原如牛奶、鸡蛋而言，花生过敏通常是终生的，只有10%的过敏儿童会随年龄的增长产生耐受性。对花生过敏的患者来说，不吃含有花生的食物是目前最有效的预防方法。鉴别食品中的花生成分过敏原是保障易过敏消费者的安全，降低过敏的发病率的最有效措施。 目前食物过敏仍只能预防不可治愈。近年来食品安全事件不断发生，食品过敏已成为重要的食品安全问题。食品安全问题受到越来越多的重视。特别是随着食品工业的迅速发展，食品过敏为食品监管和检测等提出了新的挑战。美国和欧盟制定了食品过敏原标签法规，法规要求生产企业明确表明其产品中是否含有8大类主要的食品过敏原。美国及欧盟等国家开始对部分进口的食品进行花生过敏原抽检，而我国食品出口企业常因食品过敏原标注与实际不准确而遭遇退货。根据检验检疫工作实际，需要研制出方便、快捷、易于携带的检测花生过敏原的新方法。 2.2 与国内外相关标准、文献的关系 目前检测食品中花生过敏原成分主要有2种方法：（1）检测花生过敏原蛋白成分（2）检测过敏原基因残留。食物过敏原在食品中的含量非常少，而且还可能被其他东西包裹，所以食物过敏原蛋白的检测十分困难和不易，检测过敏原蛋白容易出现假阳性。过敏原DNA残留检测技术主要依靠各种PCR技术。PCR和Real-time PCR具有高度灵敏性、无放射性污染等优点已经在食品安全检测各领域中广泛应用。国内外已有使用PCR技术扩增花生主要过敏原的文献报道。 环介导等温扩增法（loop-mediated isothermal amplification，LAMP），是由日本的荣研株式会社的Notomi等人2000开发出来的一种新型的核酸扩增方法，其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物，在链置换DNA聚合酶（Bst DNA polymerase）的作用下，60~65℃恒温扩增，15～60min左右即可核酸扩增，效率可达109～1010个数量级，具有操作简单、特异性强、产物易检测等特点。在DNA合成时，从脱氧核酸三磷酸基质（dNTPs）中析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的镁离子反应，产生大量的焦磷酸镁沉淀，呈现白色。并可与双链DNA显色剂结合通过颜色变化观察判定结果。因此，可以把浑浊度或颜色变化作为反应的指标，而不需要繁琐的电泳和紫外观察。由于LAMP反应不需要昂贵的PCR仪器和昂贵的试剂，在检验检疫工作中有广泛的应用前景。LAMP技术具有高特异性、高效率和快速反应等特点，可以大量扩增所需的靶序列，该方法方便、快捷、易于携带只需要极少的试剂费用和水浴锅即可完成绝大多数PCR检测过程，无论是在实验室检验还是现场检验都可以准确、快速