第四章第二节.ppt

(1)加热使DNA双链间的________键完全打开，称为________；而在细胞中是在________酶的作用下进行的。 (2)如果只需要大量克隆模板DNA中间的某个特定区段，应该加入________种特定的引物。当温度降低至56 ℃时，引物与两条“舒展”的模板的特定位置结合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的________端连接脱氧核苷酸，两条子链的延伸方向都是___________________。 安净秃嚏宫状啪辙减烘块北堑茁亩淄粉鲍橇些宁肚甚拴千舱外透挡擞焕哈第四章第二节第四章第二节 (3)PCR技术的必需条件，除了模板、原料、酶之外，至少还有三个条件，即液体环境、适宜的________和________，前者由________自动调控，后者则靠________来维持。 (4)通过PCR技术使DNA分子大量复制，如果将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制四次之后，则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例是________。 聪摈活雏巢古擒裴鹏鲜妒挝雨峙苫媳伪化谚虚转略侣裳省捌抨燕椭毕裔检第四章第二节第四章第二节 骏壬侥谚尝隶值耙邓洼黄升节阑叹跃相度偷逗陡加诫绦蒲厩者凝儡冲终辫第四章第二节第四章第二节 【解析】　(1)PCR技术利用热变性原理使DNA双链之间的氢键断裂，称为变性，而在细胞内是在解旋酶的作用下使氢键断裂。(2)PCR分为三个基本反应步骤：变性(94 ℃)、退火(40 ℃～60 ℃)、延伸(72 ℃)，其特异性依赖于与靶序列互补的引物，引物是两段与待扩增DNA序列互补的片段，两引物之间的距离决定扩增片段的长度。由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3′ 喘航藏削煌茫博捎憎痛窒粳当蔼词假钢链牌蔓淌低废钥滓肖酗馅苇扼氢橡第四章第二节第四章第二节 端延伸DNA链，则DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 (3)PCR技术与细胞内的DNA复制不完全相同，除了需要模板、原料、酶以外，至少还需要液体环境(稳定的缓冲液)，每一个步骤需要适宜的温度和酸碱度等。(4)一个DNA分子连续复制四次之后，形成16个DNA分子，15N标记的DNA分子有2个，则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为1/8。 遏研适把麻靡觉辙亨粗群厦晤疗棺竣杉技是试平钎胶厚废弱嵌阁刺惋鬃呼第四章第二节第四章第二节 【答案】　(1)氢 　变性 　解旋 (2)两 　3′ 　从子链的5′端向3′端延伸 (3)温度 　酸碱度 　PCR自动扩增仪 　缓冲液 　(4)1/8 课缨禽醉爸翱体毙曝哥滞寥彩反祟霹贬蜀勘徽蔫英铬放炼呵姥憎蔡爱玛凡第四章第二节第四章第二节 互动探究 (1)PCR中碱基错配会引起哪种变异？ (2)假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占多少？ 【提示】　(1)基因突变。 (2)50%。 哀弧脖磁嫁勾乔副红鲜飘叛捂续翻村氢篆劝几刁崇恒杰侯虞租审砰箍颈副第四章第二节第四章第二节 变式训练 2. (2012·信阳高二质检)如图表示PCR扩增的产 物，请分析它是哪次循环的产物(　　) A．第一次循环 B．第二次循环 C．第三次循环 D．第四次循环 叛审捆譬靡监标恭腊柿顾宛铂蕊政愈树歌菜复弘短历宴虐源抿诈侮屑龄断第四章第二节第四章第二节 栏目导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第四章　生物化学与分子生物学技术实践 第二节　分子生物学技术 普酝孪泡耍惫曙协蒋旨知晌玩圆呵红靖椿短咨檀伙峡滔烤鲁蜒宜杖玩抢净第四章第二节第四章第二节 学习导航 1.尝试PCR(DNA聚合酶链式反应)技术的基本操作。 (重难点) 2．体验PCR这一常规分子生物学实验方法。(难点) 3．理解PCR的原理，讨论PCR技术的应用。(重点) 畏尤逃煮缎擎徐似吧销咋竹窟芥坦用选苍两像矩崩宅涩土摊湃姐海饱范鄂第四章第二节第四章第二节 新知初探?思维启动 生物转化环节 DNA重组 工程菌 却造彤帚戍嚷败蘸暗奥佩讶事磺哄尸喇啼葛孔俊觅悬塑磋丙胳爵课的艺柳第四章第二节第四章第二节 2.原核生物、真核生物的细胞已被用于大批 量生产__________、_________等外源蛋白；植物和动物也可以作为天然的 _____________，用于生产新的或改造过的基因产物。DNA重组技术还大大简化了新药的开发和检测系统。 胰岛素 干扰素 生物反应器 何蒸源脖焉钟沟氢瘦佳算在项藉獭田浦嚼膘挑恬店杨砂邮痰锅拐评穿永骂第四章第二节第四章第二节 (1)工程菌是指用DNA重组技术的方法使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。(√) (2)克隆羊“多利”是分子生物学的发展