MM_FS_CNJ_0130出口肉及肉制品中磺胺间二甲氧嘧啶残留量检验方法.doc
MM_FS_CNJ_0130出口肉肉制品猪肉磺胺间二甲氧嘧啶残留量气相色谱法外标法定量
MM_FS_CNJ_0130
出口肉及肉制品中磺胺间二甲氧嘧啶残留量检验方法
1.适用范围
本方法适用于出口冻鸡、分割猪肉、分割牛肉、填鸭中磺胺间二甲氧嘧啶残留量的检验。
肉类中残留的磺胺间二甲氧嘧啶采用乙腈提取，提取液加盐酸溶液后蒸去乙腈，再用正己烷分配净化。用氢氧化钠溶液调节pH至5.5～6.0，加三氯甲烷反提取，以重氮甲烷甲酯化，用配有电子俘获检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。
乙腈：用全玻璃器皿重蒸馏，收集81～82℃馏分；
正己烷：用全玻璃器皿重蒸馏，收集67～69℃馏分；
三氯甲烷：用全玻璃器皿重蒸馏，收集61～62℃馏分；
乙酸乙酯：用全玻璃器皿重蒸馏，收集76～78℃馏分；
丙酮；
乙醚：用全玻璃器皿重蒸馏，收集33～34℃馏分；
柠檬酸三钠溶液：取柠檬酸三钠，用水制备成饱和溶液；
无水硫酸钠：650℃灼烧4h。冷却后贮于密封容器中备用；
重氮甲烷乙醚溶液：在125mL的蒸馏瓶中，加入35mL乙醇、10mL乙醚和10mL氢氧化钾水溶液(6g/10mL)。放入磁棒，并固定在磁力搅拌器加热板上的水浴中。连接漏斗和冷凝器并串联两个125mL锥形瓶，锥形瓶中各置有10mL乙醚。冷凝收集管插入乙醚液面下，锥形接收瓶置于冰浴中。滴液漏斗内盛有21.5g的N甲基N亚硝基p甲苯磺酰胺溶于140mL乙醚的溶液(重氮试剂)。加热水浴至70℃，进行蒸馏，蒸馏瓶内溶液边用磁力搅拌，边滴加重氮试剂，滴完全部溶液的时间控制在20min以上。当馏出液近于无色时，停止蒸馏。将两个锥形接收瓶中的溶液合并，并在70℃水浴上重蒸馏。将馏出液(重氮甲烷乙醚溶液)密封，并于－18℃保存。保存期一个月；
当心：重氮甲烷有毒，有特异性过敏，而且易引起爆炸。配制重氮甲烷乙醚溶液、甲酯化或蒸发均应在通风橱中进行。重氮甲烷乙醚溶液应贮于冷冻器内，不要暴露于直射阳光或强烈的人工光；
磺胺间二甲氧嘧啶标准品：纯度≥99%；
磺胺间二甲氧嘧啶标准溶液(0.100mg/mL)：准确称取10.0mg的磺胺间二甲氧嘧啶标准品，用少量丙酮溶解并准确定容至100mL，摇匀，为标准储备液。根据需要再配制成适用浓度的标准工作溶液。
气相色谱仪：配备电子俘获检测器和毛细管柱上进样器；
高速组织捣碎机；
振荡器；
旋转蒸发器；
恒温水浴锅；
全玻璃系统蒸馏装置；
pH计。
以不超过2500件为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。
批量，件
最低抽样数，件
1～25
1
26～100
5
101～250
10
251～500
15
501～1000
17
1001～2500
20
按规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取500g(或一袋)作为原始样品，原始样品总重量不少于2kg。放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。
从每袋原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放入高速组织捣碎机中捣碎均匀。充分混匀，用四分法缩分出不少于500g试样。装入清洁的容器内，加封后，标明标记。
将试样于－18℃以下冷冻保存。
注：在抽样及制样过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
取经绞碎混匀的试样约20g(精确至0.1g)于250mL具塞锥形瓶中，加入50mL乙腈，于振荡器上提取30min。用中速定量滤纸将乙腈提取液过滤于蒸发瓶中，并用30mL乙腈分三次洗涤残渣。加入10mL盐酸溶液(1mol/L)，然后在35℃水浴中旋转蒸发浓缩以除去有机溶剂。
将酸相移入至125mL分液漏斗中，再用10mL盐酸溶液(1mol/L)分两次洗涤蒸发瓶，并将洗液并入125mL分液漏斗中。加入20mL正己烷，振摇1min，静置10min，弃去有机层。再用2×20mL正己烷重复净化两次。然后在酸相中加入20mL饱和柠檬酸三钠溶液，用氢氧化钠溶液(3mol/L)调节pH至5.5～6.0。用3×20mL三氯甲烷振摇提取三次。合并三氯甲烷提取液，经无水硫酸钠脱水后，收集于100mL蒸发瓶中，然后在35℃水浴上旋转蒸发至干。
加入1mL丙酮以溶解残渣，再加入2mL重氮甲烷乙醚溶液，加塞。室温下避光放置30min，其间进行断续轻摇。反应结束后，通以氮气流吹干。准确加入2.00mL乙酸乙酯正己烷混合液(3＋7)以溶解残渣，供气相色谱测定。
取适用浓度的标准工作溶液于具塞试管中，用氮气吹干，按上述操作进行甲酯化后，供气相