常见缓冲溶液配制.pdf
实验室常用缓冲液配置方案
1)1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度：1MTris-HCl
配制量：1L
配制方法：
1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
PH值浓HCl
7.4约70ml
7.6约60ml
8.0约42ml
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，
温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度：100mMTris-HCl,10mMEDTA
配制量：1L
配制方法：
1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1MTris－HClBuffer（PH7.4，7.6，8.0）100ml
500mMEDTA(PH8.0)20ml
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定容至1L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
3)1.5MTris-HCl(pH8.8)
组份浓度：1.5MTris-HCl
配制量：1L
配制方法：
1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，
温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3M醋酸钠(pH5.2)
组份浓度：3M醋酸钠
配制量：100ml
配制方法：
1.称量40.8gNaAc·3H2O（或者24.6g无水NaAc）置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的
去离子水搅拌溶解
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2
3.加去离子水将溶液定容至100ml
4高温高压灭菌后，室温保存。
5)PBSBuffer
组份浓度：137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4
配制量：1L
配制方法：
1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。
NaCl8g
KCl0.2g
Na2HPO41.42g
KH2PO40.27g
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mM
MgCl2。
6)10M醋酸铵
组份浓度：10M醋酸铵
配制量：100ml
配制方法：
1.称量77.1g醋酸铵置于100～200ml烧杯中，加入约30ml的去离子水搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100ml。
3.使用0.22mm滤膜过滤除菌。
4.密封瓶口于室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
7)苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)
配制方法：
1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋
白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2.配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24:1）混合均匀后，移入棕色
玻璃瓶中4℃保存。
8）10％(W/V)SDS
组份浓度：10％(W/V)SDS
配制量：100ml
配制方法：
1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解
2.滴加浓盐酸调节pH值至7.2
3.将溶液定容至100ml后，室温保存。
9）2NNaOH
组份浓