PBS缓冲溶液的配制.pdf

PBS 标准配方如下（1L）： 成分 分子量 终浓度（mM ） 用量（g ） 近似用量（g ） 半数用量（g ） NaCl 58.44 137 8.006 8.00 4.00 KCl 74.551 2.7 0.201 0.20 0.10 Na HPO ·12H O 358.14 10 3.581 3.58 1.79 2 4 2 KH PO 136.086 1.76 0.240 0.24 0.12 2 4 理论上需要调pH ，但在实际操作中，用蒸馏水或者超纯水配制后，pH 在7.3 左右，所以通常不用调pH 。 10×PBS 配方如下（1L）： 成分 近似用量（g ） NaCl 80.0 KCl 2.0 Na HPO ·12H O 35.8 2 4 2 KH PO 2.4 2 4 10×PBS 保存于4 ℃时，会析出晶体，且不易复溶，因此10×PBS 要在室温保存。 PBS 在室温保存时容易长菌，应保存于4 ℃。 关于PBS 配方的比较与讨论： 我们平时会用到PBS ，但网上PBS 的配方有多种，不知如何选择？ 参考一： 看你的用途了。配方虽然有多种，但在“等渗”这个概念上相差都不大。常见的配方一般有三种： 1、0.9% 的生理盐水 有些人也把它叫做PBS ，实际上是错误的概念，它并没有“PB”，没有缓冲能力，纯化少用。 2 、pH7.3 ，137mM NaCl，2.7mM KCl ，10mM Na HPO ，1.8mM KH PO 。 2 4 2 4 经验证，这种配方是没有办法加钙离子和镁离子的，会形成沉淀。此配方为0.01M 的PBS ，所对应的 质量分别为8g NaCl，0.2g KCl，1.44g （1.42g）Na HPO 和0.24g （0.27g ）KH PO 。考虑到Na HPO 通常 2 4 2 4 2 4 为Na HPO ·12H20，所以应该加3.58g 。（修正过的）。 2 4 这个配方比较常用的，含K ，特别在分子生物学上常用。通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所 有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免 疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入 100u/ml 青霉素和链霉素之后再调pH 、定容、灭菌消毒。 3、pH7.2～7.4，20mM PB ，150mM NaCl 这个配方是蛋白质纯化常用的PBS ，配制起来比较方便。 具体到称量方面，要注意试剂是否有结晶水，分子量是不同的。 参考二： 关键看用途，如果是要活性，要考虑你的目的蛋白在什么样的环境下稳定，主要是掌握好钠钾平衡和 生理状态下离子强度，在此前提下有一定的缓冲能力。 参考三： PBS 是phosphate-buffered saline 的意思。 看看下面这个，或许对你有用 Applications PBS has many uses because it is isotonic and non-toxic to cells. It