高中生物基因工程的基本操作程序新人教版选修.ppt

培养培养导入含目的基因的重组Ti质粒导入农杆菌含有氨苄青霉素的完全培养基不能存活Ca2+处理细胞形成感受态细胞检测农杆菌农杆菌（培养不具有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性积基因的农杆菌）具有氨苄青霉素抗性基因的农杆菌农杆菌不具有氨苄青霉素抗性基因的农杆菌完全培养基含有氨苄青霉素的完全培养基农杆菌证明：目的基因已导入存活第31页，共48页，星期日，2025年，2月5日脱分化组织培养脱分化农杆菌导入植物细胞通过组织培养产生新个体再分化移植个体生物学水平的鉴定如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达导入植物细胞组织培养第32页，共48页，星期日，2025年，2月5日花粉管通道法：将目的基因导入植物细胞①操作方法：②特点：在植物花受粉后，花粉形成花粉管还末愈合前期，剪去柱头，然后，滴入DNA（含的基因）使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞十分简便经济③例：转基因抗虫棉第33页，共48页，星期日，2025年，2月5日基因枪法：利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法①操作方法：②金属粒：将目的基因导入单子叶植物细胞钨粉粒子和金粉粒子，粒子的直径一般在0.6～4um。③适用：单子叶植物第34页，共48页，星期日，2025年，2月5日关于高中生物基因工程的基本操作程序新人教版选修第1页，共48页，星期日，2025年，2月5日一.目的基因的获取1.基因的结构2.目的基因的概念3.目的基因的获取的方法第2页，共48页，星期日，2025年，2月5日1.基因的结构（1）原核生物基因结构编码区非编码区非编码区编码区上游编码区下游编码蛋白质调控遗传信息的表达（调控程序）…A‥………ATGTGCACGTAGTTA………‥G……T‥………TACACGTGCATCAAT………‥C…启动子终止子第3页，共48页，星期日，2025年，2月5日编码区非编码区非编码区启动子终止子ATGTGCACGTAGTTATACACGTGCATCAATRNA聚合酶AUGUGCACGUAGUUA启动子：位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子，基因就不能转录。RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合的一种蛋白质.终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。第4页，共48页，星期日，2025年，2月5日编码区非编码区非编码区（能编码蛋白质）启动子终止子（2）真核与原核生物基因结构的比较外显子内含子编码蛋白质（不能编码蛋白质）①相同点：都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区。②不同点：原核细胞基因的编码区是连续的；真核细胞的编码区是间隔的，不连续的。第5页，共48页，星期日，2025年，2月5日2.目的基因的概念主要是指编码蛋白质基因例如：与生物抗逆性相关的基因，与生物优良品质相关的基因，药物和保健品相关的基因，与毒物降解相关的基因，以及与工业所需要酶相关的基因。目前被广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。第6页，共48页，星期日，2025年，2月5日3.目的基因的获取的方法（4）从已有物种分离出目的基因（3）用化学方法直接人工合成目的基因（1）从基因库中获取目的基因（2）应用PCR技术扩增目的基因第7页，共48页，星期日，2025年，2月5日（1）从基因库中获取目的基因①基因文库和部分基因文库的慨念②基因组文库和cDNA文库的主要区别③怎样从基因文库中找到我们所需要的目的基因第8页，共48页，星期日，2025年，2月5日①基因文库和部分基因文库的慨念：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。基因文库中包含了一种生物所有的基因,这种基因文库叫做基因组文库。基因文库中包含了一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库。如：cDNA文库。第9页，共48页，星期日，2025年，2月5日基因组文库的建立方法提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶酶切一定大小的DNA片段将DNA片段与运载体连接导入受体菌中储存基因组文库方法一：直接分离法(鸟枪法)第10页，共48页