高中生物选修三基因工程的基本操作程序.ppt

常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。将目的基因导入受体细胞的原理借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。三.目的基因导入受体细胞转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。第31页，共53页，星期日，2025年，2月5日①特点:农杆菌转化法：（1）将目的基因导入植物细胞能感染双子叶植物和祼子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力②过程：Ti质粒的T—DNA可转移至受体细胞并整合到其染色体上③适用生物：双子叶植物、祼子植物。第32页，共53页，星期日，2025年，2月5日Hind限制性酶ⅠⅡHindIIIHindIII目的DNATi质粒苏云金杆菌构建表达载体Bt毒素蛋白基因苏云金杆菌DNA连接酶T-DNA(可转移-DNA)知识拓展农杆菌转化法的过程：第33页，共53页，星期日，2025年，2月5日基因枪法：利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法①操作方法：②金属粒：将目的基因导入单子叶植物细胞钨粉粒子和金粉粒子，粒子的直径一般在0.6～4um。③适用：单子叶植物第34页，共53页，星期日，2025年，2月5日适用于单子叶植物基因枪法第35页，共53页，星期日，2025年，2月5日花粉管通道法：将目的基因导入植物细胞①操作方法：②特点：在植物花受粉后，花粉形成花粉管还末愈合前期，剪去柱头，然后，滴入DNA（含目的基因）使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞十分简便经济③例：转基因抗虫棉第36页，共53页，星期日，2025年，2月5日胚珠花药花丝柱头花柱子房壁子房雄蕊雌蕊第37页，共53页，星期日，2025年，2月5日花粉管通道法适用于被子植物第38页，共53页，星期日，2025年，2月5日关于高中生物选修三基因工程的基本操作程序第1页，共53页，星期日，2025年，2月5日补充：1.原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚合酶结合位点启动子终止子启动子：位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子，基因就不能转录。终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片段，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合的一种蛋白质.(以模板转录然后脱落)第2页，共53页，星期日，2025年，2月5日①不能转录为信使RNA，不能编码蛋白质。：能转录相应的信使RNA，能编码蛋白质编码区非编码区原核细胞的基因结构②有调控遗传信息表达的核苷酸序列，在该序列中，最重要的是位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点。非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游启动子终止子第3页，共53页，星期日，2025年，2月5日编码区非编码区非编码区与RNA聚合酶结合位点内含子外显子能够编码蛋白质的序列叫做外显子不能够编码蛋白质的序列叫做内含子启动子终止子编码区上游编码区下游内含子：外显子：2.真核细胞的基因结构第4页，共53页，星期日，2025年，2月5日真核细胞的基因结构编码区非编码区外显子：能编码蛋白质的序列内含子：不能编码蛋白质的序列：有调控作用的核苷酸序列，包括位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点等。非编码序列：包括非编码区和内含子第5页，共53页，星期日，2025年，2月5日原核细胞真核细胞不同点编码区是_____的编码区是间隔的、_____的相同点都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的原核细胞与真核细胞的基因结构比较思考编码相同数目氨基酸的蛋白质，原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗？连续不连续编码区非编码第6页，共53页，星期日，2025年，2月5日1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定基因工程基本操作的四个步骤第7页，共53页，星期日，2025年，2月5日一、目的基因的获取(一)、目的基因主要是______________________编码蛋白质的结构基因请举出三个以上的例子（二）、获取目的基因的常用方法有哪些?1、从基因文库中获取2、利用PCR技术扩增3、人工