HPLC色谱样品预处理课件.ppt

HPLC色谱样品预处理;一、概述;二、样品处理的目的;三、样品处理的原则; 样品的处理过程应当尽可能简单易行，所采用样品处理装置的尺寸应当与处理的样品量相适应 在采样之后应当尽可能快的进行样品的分析测定，或者使用合适的方法消除这些可能的变化和干扰。 ;四、常用的样品预处理的技术;4.1 过滤、离心;4.2 溶剂萃取 ; 加速溶剂萃取技术ASE 加速溶剂萃取技术（accelerated solvent extraction）其是一种新的液-固萃取技术。其原理是选择合适的溶剂、通过增加温度和压力来提高萃取过程的效率。是一项高效的萃取技术。姜宁等用ASE技术对开胸顺气丸中厚朴酚与和厚朴酚进行检测，结果获得了较高的提取效率，比《中国药典》2005版节省了一半的时间。 超临界流体萃SFE 超临界流体萃（Supercritical fluid extraction-SFE），是利用超临界流体对物质的特殊溶解性能原理而建立的萃取方法。超临界CO2作为常用的萃取剂已被广泛应用于天然药物中非极性和弱极性有效成分的提取。 ;4.3 固相萃取 ;4.4 微萃取 ; SPME发展至现在已有多种形式出现，包括 纤维针式固相微萃取 (Fiber SPME) 管内固相微萃取 (in-tube SPME) 固相微萃取搅拌棒技术 (SBSE)等; 毛细管固相微萃取 毛细管固相微萃取是将气体或液体样品通过内壁键合了萃取剂的石英毛细管，使欲分离组分从萃取剂中解析下来，进行分析。 毛细管固相微萃取可获得比使用固相微萃取时萃取体积大十倍以上的萃取体积，使萃取的富集倍数大大提高，另外可以加速萃取平衡，可比SPME萃取头的使用寿命更长10倍以上。;液相微萃取 1996年首次提出液相微萃取第一个模型即Drop in Drop模型。该技术是在液-液萃取(LLE)的基础上发展起来的，主要是基于相平衡的原理，该技术集采样、萃取和浓缩于一体，所需有机溶剂只需要几或几十微升，是一项环境友好的新型样品前处理技术，其特别适合于环境样品中痕量、超痕量污染物的测定。 如今发展出了单滴溶剂微萃、取直接液相微萃取(DI．LPME)、顶空液相微萃取(HS．LPME)、中空纤维液相微萃取(HF．LPME)和分散液相微???取(DLLME)。 ;4.5 衍生化; 高效液相紫外衍生化技术，主要是为了使一些没有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外检测器检测，往往通过衍生化反应在这些化合物的分子中引入强紫外吸收的基团。 高效液相色谱荧光衍生化技术已经被广泛应用于醇、酸、糖，雌激素，生物碱的检测，其中在氨基酸样品的分析方面应用最广，并且获得了长足的发展，无论是检测手段，还是衍生方法都趋于完善。 ; 高效液相电化学衍生化技术，是使样品组分与衍生化试剂反应，生成具有电化学活性的衍生物，以便对电化学检测有较灵敏的响应。 陈春晓通过用碱性铁氰化钾(衍生剂)在线衍生化使食品中的维生素B1转化为硫胺荧，以荧光检测器检测其含量,此方法省略了国标方法中用正丁醇萃取的过程。大大减少了检测人员与有机溶剂正丁醇接触的机会。在线衍生技术克服了离线手工衍生的偏差，与荧光检测器联用能有效提高检测的灵敏度，避免了国标方法中因正丁醇萃取不完全造成的待测物损失。;4.5 免疫亲和色谱 ;五、在线联用技术;;五 发展方向; 谢谢！！！