紫外可见分光光度2.ppt

第三节 紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度计的基本结构 主要部件 Grating Monochromator Monochromator -- Dispersion Monochromator --Light gathering Monochromator --Spectral Bandwidth Effect of slit width Photomultiplier tube (PMT) Photodiode arrays - (multichannel transducer) 光固态图象传感器 光固态图象传感器, 由光敏元件阵列和电荷转移器件集合而成。 核心是电荷转移器件CTD（Charge Transfer Device），最常用的是电荷耦合器件CCD（Charge Coupled Device）。 由于它具有光电转换、信息存储、延时和将电信号按顺序传送等功能，以及集成度高、功耗低的优点，因此被广泛地应用。 电荷转移器件CTD 光路类型 典型仪器光路 一、定性分析 1）比较法 2）计算不饱和有机物最大吸收波长的经验规则 例1 a,b-不饱和羰基化合物 例：计算最大紫外吸收波长 斯科特(Scott)规则 斯科特规则应用 二、定量分析 1. 单组分样品的定量方法 吸收光谱重叠情况 双波长法 双波长分光光度计 （2）系数倍率法 双波长法测定浑浊样品 导数分光光度法 导数光谱法的特点： 分光光度滴定法 动力学分光光度法 在电化学研究方面的应用 Performance Characteristics: Figures of Merit Dynamic Range Calibration curves (working or analytical curves) Selectivity: 三 、其他方面应用 有机化合物构型和构象的确定 相对分子质量的测定 氢键强度的测定 测定酸碱离解常数 测定配合物的组成及其不稳定常数 作业 武汉大学《分析化学》（第五版）下册 P259: 9-11; 9-13; 9-15; 9-16 适用于干扰组分的吸收光谱中找不出等吸收波长的体系； 假设某一组分在选定两个波长λ1和λ2处测得的吸光度的比值为K，即A1 / A2=K，则 △A = K A2 - A1 = 0 。 λ1 λ2 令KAbl2 = Abl1 倍率系数仪 l2 样品吸收峰 样品吸收+背景吸收 l1 样品无特征吸收 背景吸收 注意：双波长与双光束是不同概念！ 一阶导数 二阶导数 三阶导数 用双波长扫描 更多采用对信号进行模拟微分 p1 p2 d z 基线法(正切法)d； 峰谷法p； 峰零法z 导数光谱峰（正峰或负峰）增多，谱带宽度变小，分辨能力增高。 辨别肩峰 消除共存组分的干扰 找吸收峰位 灵敏度提高 E滴 0 E测 = E产 =0 E产 0 E测 = E滴=0 V A V A E滴E产 0 E测 =0 A V R + M = P + Q 化学反应速率与反应物浓度之间的关系为基础。 胶束增溶分光光度法 表面活性剂胶束 吸收系数增大 分光光度法与电化学结合起来——光谱电化学 光谱电化学技术有透射技术、镜反射技术和内反射技术三种 可以同时获得氧化还原体系的吸收光谱和电化学参数 How to choose an analytical method? How good is measurement? How reproducible? – Precision How close to true value? - Accuracy/Bias How small a difference can be measured? – Sensitivity What range of amounts? - Dynamic Range How much interference? - Selectivity At detection limit we can say confidently analyte is present butcannot perform reliable quantitationLevel of quantitation (LOQ): k=10Limit of linearity (LOL): when signal is no longer proportional to concentration Dynamic range: LOL/LOQ 102 to 106