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FAT10基因沉默对人食管癌细胞凋亡及肿瘤干细胞特性的影响 王志强1，张建军2(1解放军150医院心胸外科，河南省洛阳市 471031；2天津市第四中心医院，神经外科，天津市 300143) 引用本文：王志强，张建军. FAT10基因沉默对人食管癌细胞凋亡及肿瘤干细胞特性的影响[J].中国组织工程研究，2016，20(50):7453-7459. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.50.001 ORCID: 0000-0003-4828-8544(王志强) 文章快速阅读： 文题释义： 基因沉寂：也可以被称为“基因沉默”。基因沉寂是真核生物细胞基因表达调节的一种重要手段。在染色体水平，基因沉寂实际上是形成异染色质(Heterochromatin)的过程，被沉寂的基因区段呈高浓缩状态。 肿瘤干细胞：目前有两种理论解释，一是随机化理论，它认为肿瘤细胞具有同质性，即每一个肿瘤细胞都具有新生肿瘤的潜力，但是能进入细胞分化周期的肿瘤细胞很少，是一个小概率随机事件。而分层理论认为，肿瘤细胞具有功能异质性，只有有限数目的肿瘤细胞具有产生肿瘤的能力，但这些肿瘤细胞再生肿瘤是高频事件。虽然两种理论都认为只有很少数量的肿瘤细胞能再生肿瘤，但是机制是完全不同的。目前的实验结果倾向于第二种解释，即肿瘤组织中存在数量稀少的癌细胞，在肿瘤形成过程中充当干细胞的角色，具有自我更新、增殖和分化的潜能，虽然数量少，却在肿瘤的发生、发展、复发和转移中起着重要作用，由于其众多性质与干细胞相似，所以这些细胞被称为肿瘤干细胞。 摘要 背景：人类白细胞抗原F介导转录因子10 (human leukocyte antigen F-associated transcript 10，FAT10)在结肠癌等很多种肿瘤细胞中会发生高表达，但其与食管癌的关系报道较少。 目的：观察siRNA干扰技术沉默类泛素蛋白(FAT10)基因表达对人食管癌细胞EC9706细胞的侵袭、凋亡及及肿瘤干细胞特性的影响。 方法：根据FAT10 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列，瞬时转染EC9706细胞。将人食管癌细胞EC9706细胞分为3组，设FAT10 siRNA组，阴性对照组、空白对照组。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FAT10及bcl-2的表达；CCK-8法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术观察细胞凋亡及肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达；TUNEL染色检测各组细胞的的凋亡、细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力。 结果与结论：①RT-PCR和Western blot显示，FAT10 siRNA组较阴性对照组和空白对照组FAT10 及bcl-2 mRNA和蛋白表达都明显下降(P 0.05)；②肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达比例显著降低(P 0.05)； ③与阴性对照组和空白对照组相比，FAT10 siRNA组细胞的凋亡率明显升高(P 0.01)，增殖、侵袭力显著下降(P 0.05)。④结果表明，特异性沉默FAT10 基因表达能够降低食管癌细胞的侵袭力，抑制细胞的增殖，促进bcl-2表达降低，使其凋亡显著增加，使具有CD44+CD133+肿瘤干细胞特性的细胞比例降低。 关键词： 干细胞；肿瘤干细胞；RNA干扰；FAT10；凋亡；食管癌 主题词： 干细胞；RNA干扰；肿瘤干细胞；细胞凋亡；食管癌；组织工程 缩略语： 人类白细胞抗原F介导转录因子10：human leukocyte antigen F-associated transcript10，Effects of FAT10 gene silencing on apoptosis of human esophageal cancer cells and the characteristics of cancer stem cells Wang Zhi-qiang1, Zhang Jian-jun2 (1Department of Cardiothoracic Surgery, the 150th Hospital of Chinese PLA, Luoyang 471031, Henan Province, China; 2Department of Neurosurgery, Tianjin Fourth Central Hospital, Tianjin 300143, China) Abstract BACKGROUND: Human leukocyte antigen F-associated