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DEK基因沉默对人头颈鳞癌PCI-37B细胞增殖和凋亡影响的研究的开题报告

一、选题背景及意义

人头颈鳞癌是指发生在头颈部癌症中鳞状细胞最常见的一种。近年来该疾病的发病率逐年上升，已成为全球范围内重要的健康问题。治疗人头颈鳞癌的方法包括手术切除、放化疗、免疫治疗等，但其五年生存率仍然较低。因此，进一步探索人头颈鳞癌的发病机制及寻找有效的治疗方法具有重要的临床意义。

DEK基因是编码一种核蛋白的基因，在细胞增殖、凋亡和DNA修复等生物学过程中起着重要作用。一些研究表明DEK基因在人头颈鳞癌的发生和发展中发挥着一定的作用，但其具体机制仍未明确。因此，本研究旨在探究DEK基因的沉默与人头颈鳞癌PCI-37B细胞增殖和凋亡之间的关系，以期为人头颈鳞癌的治疗提供新的思路和策略。

二、研究目的和内容

目的：

通过实验研究DEK基因在人头颈鳞癌PCI-37B细胞增殖和凋亡中的作用及其机制，为人头颈鳞癌的治疗提供新的理论和实践依据。

内容：

1.根据RNAi技术的原理，构建沉默DEK基因的RNAi表达载体；

2.转染RNAi表达载体到PCI-37B细胞内，观察DEK基因的表达情况；

3.采用MTT实验、流式细胞术等技术，检测DEK基因沉默对PCI-37B细胞增殖和凋亡的影响；

4.通过Westernblot技术检测相关蛋白的表达，探究DEK基因沉默对PCI-37B细胞增殖和凋亡中信号通路的影响。

三、研究方法及步骤

1.构建RNAi表达载体

采用基因克隆技术构建RNAi表达载体，并进行限制性酶切及测序验证，最终获得正确的RNAi表达载体。

2.转染RNAi表达载体

使用Lipofectamine2000技术将RNAi表达载体转染到PCI-37B细胞内，并通过荧光显微镜观察RNAi表达载体的转染情况和DEK基因的沉默效果。

3.检测细胞增殖和凋亡

采用MTT实验和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡率，通过CCK-8实验和WST-8实验来进一步验证结果。

4.检测相关蛋白的表达

通过Westernblot技术检测相关蛋白的表达水平，探究DEK基因沉默对PCI-37B细胞增殖和凋亡中信号通路的影响。

四、研究预期结果

本研究预期结果是，DEK基因的沉默能够显著抑制PCI-37B细胞的增殖，促进其凋亡，同时能够影响相关的信号通路。该研究成果对于揭示人头颈鳞癌的发病机制和开发新型治疗手段都具有一定的意义。