F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机理初步研究的开题报告.pdf
F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机理初步研
究的开题报告
题目:F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机理初步研究
一、研究背景和意义:
子宫内膜癌(endometrialcarcinoma,EC)是妇科常见恶性肿瘤,
发病率与其他妇科肿瘤相比呈上升趋势。分子生物学研究表明,F10
(Factorten)可能参与了EC的发生、发展等关键环节。F10是凝血血
管紧张素(Coagulationfactorten)的基因,是血液凝块形成和止血作用
的重要物质。以往研究鲜有报道海绵的F10在细胞生长、凋亡的调控中
的作用。因此,本研究从基因沉默的角度出发,研究F10基因在EC中的
表达及其对细胞生长和凋亡的影响,以期为EC的治疗提供新的治疗靶点。
二、研究内容、方法和步骤:
本研究计划采用基因沉默的方式,通过利用siRNA干扰技术沉默
F10基因,然后研究沉默F10基因对于KLE细胞生长和凋亡的影响以及
可能的作用机制。
步骤如下:
1.设计适合KLE细胞的F10siRNA并进行验证。
2.将沉默F10基因的KLE细胞和野生型KLE细胞分别培养。
3.细胞生长曲线检测,同时采用MTT法检测细胞增殖能力。
4.细胞凋亡检测,包括在细胞中使用propidiumiodide(PI)染色法检
测DNA的断裂、AnnexinV-FITC/PI双染矩形筛选细胞凋亡数量等。
5.Westernblot检测相关凋亡和生存信号通路标志蛋白的表达变化,
包括PARP,CleavedCaspase-3,Bax,Bcl-2等。
三、预期结果及意义:
1.验证F10在EC中的表达并初步研究其对细胞凋亡的影响。
2.将提供一个全新的治疗靶点——F10基因,丰富EC治疗手段。
3.通过明确作用机制,进一步阐述F10受Caspase家族编码基因调
控的凋亡通路。