食品中细菌菌落总数的测定.ppt

4、若所有稀释度平板菌落数均30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数计算。 5、若所有稀释度平板均无菌落生长，则应按1乘以最低稀释倍数计算。 试样例次 稀释度 选定计数稀释度 菌量/(个/g或mL) 10-2 10-3 10-4 1 平均菌落数 380 52 18 10-3 5.2x104 2 526 205 32 10-3，10-4 2.6x105 3 271 60 12 10-2 2.7x104 4 284 152 37 10-2，10-3 9.0x104 5 26 12 5 10-2 2.6x103 6 无法计数 568 312 10-4 3.1x106 6、若所有稀释度均不在30～300之间，有的300，有的又30，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 （四）?菌落计数报告方法 1、菌落数在1～100时，按四舍五入报告两位有效数字。 2、菌落数≥ 100时，第三位数字按四舍五入计算，取前面两位有效数字，为了缩短数字后面的零数，也可以10的指数表示。 3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。 4、 若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。 5、称重取样以CFU/g 为单位报告，体积取样以CFU/mL 为单位报告。 注意事项 1、无菌操作 操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。 2、采样的代表性 如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。 3、稀释液 样品稀释液主要是灭菌生理盐水，或磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水），后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱油）进行稀释，可以采用灭菌蒸馏水。   菌落总数的测定 (GB 4789.2—2010) 一、? 目的 1、??学习并掌握食品中菌落总数测定方法和原理。2?、了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中的意义 。 二、原理 细菌数量的表示方法由于所采用的计数方法不同而有两种：菌落总数和细菌总数。 1、菌落总数 是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中形成的细菌菌落总数。以 CFU/g（mL）来表示。 一定条件包括培养基成分、培养温度和时间、pH、是否需要氧气等。 按国家标准方法规定，即在需氧情况下， 36 ±1℃培养48±2 h，能在平板计数琼脂上生长发育的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。 菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，也不能区分其中细菌的种类，只包括一群在计数平板琼脂中生长发育、嗜中温的需氧和兼性厌氧的细菌菌落总数，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。 2 菌落总数测定的卫生学意义 （1）菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 （2） 食品中细菌菌落总数越多，则食品含有致病菌的可能性越大，食品质量越差；菌落总数越小，则食品含有致病菌的可能性越小。须配合大肠菌群和致病菌的检验，才能对食品做出较全面的评价。 3、细菌总数 指一定数量或面积的食品样品．经过适当的处理后，在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。细菌总数也称细菌直接显微镜数。通常以1 g或1 mL样品中的细菌总数来表示。 三?、?材料 1、?食品检样 2、?培养基 平板计数培养基，无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 3、?其它 无菌培养皿，无菌吸管，电炉、恒温培养箱等。 四、??流程 1、检样 2、做几个适当倍数的稀释液 3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加入灭菌平皿内 4、平皿内倾注15～20 mL琼脂培养基，混匀 5、36 ±1℃培养48±2小时或（24±2）小时 6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量 7、 计算菌落总数 → 报告 五、??步骤 (一)?????取样、稀