食品中细菌菌落总数的测定.ppt

三?、?材料试剂：5mol/LNaOH100ml：称2gNaOH加蒸馏水定容至100ml，分装。85%生理盐水300ml：称2.55g*组别NaCL加蒸馏水定容至300ml*组别，分装。需灭菌器材：#2022四、??流程检样01做几个适当倍数的稀释液02选择2~3个适宜稀释度各1mL,分别加入灭菌平皿内03平皿内倾注15～20mL琼脂培养基，混匀0436±1℃培养48±2小时或（24±2）小时05记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量06计算菌落总数→报告07五、??步骤和培养

无菌操作取检样25g（mL），放于225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。。落记录方法

做平板菌落数记录时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数。到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0～4℃，但不要超过24h。皿菌落数的选择

选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿，大于300的可记为多不可计。其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可以计算半个平板后乘以2，以代表一个平板的菌落数。当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开计数。菌落总数的计算若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中菌落总数结果。试样例次稀释度选定计数稀释度菌量/(个/g或mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-35.2x10425262053210-3，10-4（1.56）2.6x1053271601210-2（2.2）2.7x10442841523710-2，10-39.0x10452612510-22.6x1036无法计数56831210-43.1x106若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按公式（1）计算：所有稀释度的平板菌落数均300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数计算。PARTONE试样例次稀释度选定计数稀释度菌量/(个/g或mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-35.2x10425262053210-3，10-42.6x1053271601210-22.7x10442841523710-2，10-39.0x10452612510-22.6x1036无法计数56831210-43.1x106若所有稀释度平板菌落数均30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数计算。01若所有稀释度平板均无菌落生长，则应按1乘以最低稀释倍数计算。02试样例次稀释度选定计数稀释度菌量/(个/g或mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-35.2x10425262053210-3，10-42.6x1053271601210-22.7x10442841523710-2，10-39.0x10452612510-22.6x103600010-21.0x102若所有稀释度均不在30～300之间，有的300，有的又30，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数计算。PARTONE（四）?菌落计数报告方法菌落数在1～100时，按四舍五入报告整数。菌落数≥100时，第三位数字按四舍五入计算，取前面两位有效数字，为了缩短数字后面的零数，也可以10的指数表示。01添加标题若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。添加标题若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。0203添加标题称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。

菌落总数的测定

(GB4789.2—2010)一、的并掌握食品中菌