食品中细菌菌落总数的测定.ppt

3?、另取1mL灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1mL吸管。第14页，共49页，星期日，2025年，2月5日4、根据标准要求或对污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。同时分别取1ml稀释液（不含样品）加入两个灭菌平皿内作空白对照。第15页，共49页，星期日，2025年，2月5日5?、稀释液移入平皿后，将冷却至46℃琼脂培养基注入平皿约15～20ml，并转动平皿，混合均匀。第16页，共49页，星期日，2025年，2月5日6、?待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，水产品30±1℃温箱内培养72±3h。如样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4毫升），凝固后培养。第17页，共49页，星期日，2025年，2月5日第18页，共49页，星期日，2025年，2月5日（二）?菌落记录方法

做平板菌落数记录时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数。到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0～4℃，但不要超过24h。

第19页，共49页，星期日，2025年，2月5日

1、?平皿菌落数的选择

选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿，大于300的可记为多不可计。第20页，共49页，星期日，2025年，2月5日2、其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可以计算半个平板后乘以2，以代表一个平板的菌落数。第21页，共49页，星期日，2025年，2月5日3、当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开计数。第22页，共49页，星期日，2025年，2月5日（三）菌落总数的计算1、若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中菌落总数结果。第23页，共49页，星期日，2025年，2月5日试样例次稀释度选定计数稀释度菌量/(个/g或mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-35.2x10425262053210-3，10-4（1.56）2.6x1053271601210-2（2.2）2.7x10442841523710-2，10-39.0x10452612510-22.6x1036无法计数56831210-43.1x106第24页，共49页，星期日，2025年，2月5日2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，应以两者比值决定。若其比值小于2，应报告两者的平均数；若大于等于2，则报告稀释度较小的菌落数。第25页，共49页，星期日，2025年，2月5日试样例次稀释度选定计数稀释度菌量/(个/g或mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-35.2x10425262053210-3，10-42.6x1053271601210-22.7x10442841523710-2，10-39.0x10452612510-22.6x1036无法计数56831210-43.1x106第26页，共49页，星期日，2025年，2月5日3、?若所有稀释度的平板菌落数均300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数计算。第27页，共49页，星期日，2025年，2月5日试样例次稀释度选定计数稀释度菌量/(个/g或mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-35.2x10425262053210-3，10-42.6x1053271