基因工程链激酶(r―SK)纯化及其单克隆抗体制备和鉴定.pdf
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单克隆和基因工程抗体制备4.ppt
抗体制备技术 抗体是生物学及医学领域中应用最广泛的制剂。 抗体制备技术的发展已经历了三个阶段： 1、用纯化抗原免疫动物获得的血清, 多克隆抗体(PcAb)为第一代抗体， 2、用B细胞杂交瘤技术制备的 单克隆抗体( McAb)为第二代抗体， 3、第三代为基因工程抗体。 目前临床上使用的单克隆抗体和多克隆抗体均为动物源性抗体，具有免疫原性，在反复使用时常会诱导机体的免疫应答而产生抗抗体，这大大限制了异源性抗体在人体内的应用。随着基因工程技术的发展，人们逐渐可根据需要制备各种特异性的抗体，通过降低抗体的免
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单克隆抗体与基因工程抗体的制备.pptx
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第一节 杂交瘤技术的基本原理
一、杂交瘤技术
二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存;第三节 基因工程抗体制备
一、人源化抗体
二、小分子抗体
三、抗体融合蛋白
四、双特异性抗体
五、噬菌体抗体库技术; 第一节 杂交瘤技术的基本原理;抗体种类：
第一代抗体 多克隆抗体（polyclonal antibody)
第二代抗体 单克隆抗体（monoclonal antibody)
第三代抗体 基因工程抗体（genetic engineering antibody);B淋巴细胞:寿命短,分泌特异系性抗体
骨髓瘤细胞：寿命长
杂交瘤细胞：寿命长，单克隆抗体
;流
程;不产
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单克隆抗体和基因工程抗体的制备.ppt
三、单克隆抗体的性质鉴定 鉴定的方法很多，用已知抗原测定抗体，几乎所有的抗原抗体反应试验都可以作，如阳性，再定量，确定工作浓度。 第三十一页，共六十八页，2022年，8月28日 第三节 基因工程抗体技术 杂交瘤单克隆抗体在诊断、治疗、预防和蛋白质提纯应用中非常广泛，但对人是异源性，人抗小鼠抗体，应用基因工程技术减少小鼠源成分，保留原有的抗体特异性。 第三十二页，共六十八页，2022年，8月28日 一、人源化抗体 人源化抗体主要指鼠源性单克隆抗体的基因克隆及 DNA 重组技术改造，重新表达的
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单克隆抗体和基因工程抗体的制备讲述.ppt
1. 噬菌体显示 指将蛋白分子或肽段基因克隆到丝状噬菌体的基因组 DNA 中，使噬菌体表面表达该异源性分子，主要特点是在同一病毒颗粒内将特定分子的基因型和表型统一，在噬菌体表面表达特定蛋白，在该噬菌体核心DNA中含有该蛋白的基因。 （二）噬菌体抗体库技术 2. 噬菌体抗体 将抗体分子片段与噬菌体外壳蛋白融合，使之表达在噬菌体表面，形成噬菌体抗体，将全套抗体可变区基因，组装到表达载体，其抗体表达到噬菌体表面，得到噬菌体抗原。 在诊断、治疗中具重要意义，还有人源性抗体比鼠源性抗体的副作用低，很有发展前途。
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四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备.ppt
第一节 杂交瘤技术的基本原理 一、杂交瘤技术 二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存 第一节 杂交瘤技术的基本原理 第三节 基因工程抗体制备 将两种分泌不同特异性单抗的杂交瘤细胞进行再次融合，产生四源杂交瘤 (quadroma)。但二次杂交瘤细胞株分泌的是两套重链，轻链的随机组合物。BsAb在其中的比例可为10%～50%不等。多倍杂交瘤细胞的稳定性差，BsAb的产量少且活性低，费时费力，临床应用时存在人抗鼠抗体免疫反应 (HAMA)，因此不适用于临床。 第四节 单克隆抗体的应用 从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B淋巴细胞，提取mRNA并逆转录为cDNA； 应用抗体轻链和重链
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单克隆抗体和基因工程抗体的制备.ppt
三、单克隆抗体的性质鉴定鉴定的方法很多，用已知抗原测定抗体，几乎所有的抗原抗体反应试验都可以作，如阳性，再定量，确定工作浓度。第31页，共68页，星期日，2025年，2月5日第三节基因工程抗体技术杂交瘤单克隆抗体在诊断、治疗、预防和蛋白质提纯应用中非常广泛，但对人是异源性，人抗小鼠抗体，应用基因工程技术减少小鼠源成分，保留原有的抗体特异性。第32页，共68页，星期日，2025年，2月5日一、人源化抗体人源化抗体主要指鼠源性单克隆抗体的基因克隆及DNA重组技术改造，重新表达的抗体。其大部分氨基酸序列为人源序列所取代，既基本保留亲代鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了鼠异源性。第33页，共68页
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第四章单克隆抗和基因工程抗体的制备.ppt
第一节 杂交瘤技术的基本原理 第三节 基因工程抗体 双特异性抗体 细胞工程BsAb 将两种分泌不同特异性单抗的杂交瘤细胞进行再次融合，产生四源杂交瘤 (quadroma)。但二次杂交瘤细胞株分泌的是两套重链，轻链的随机组合物。BsAb在其中的比例可为10%～50%不等。多倍杂交瘤细胞的稳定性差，BsAb的产量少且活性低，费时费力，临床应用时存在人抗鼠抗体免疫反应 (HAMA)，因此不适用于临床。 第四节 单克隆抗体应用 ①从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B淋巴细胞，提取mRNA并逆转录为cDNA； ②应用抗体轻链和重链引物，根据建库的需要通过PCR技术扩增不同的Ig基因片段；
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第四章单克隆抗基因工程抗体的制备.ppt
第一节 杂交瘤技术的基本原理 一、杂交瘤技术 二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存 第一节 杂交瘤技术的基本原理 第三节 基因工程抗体制备 将两种分泌不同特异性单抗的杂交瘤细胞进行再次融合，产生四源杂交瘤 (quadroma)。但二次杂交瘤细胞株分泌的是两套重链，轻链的随机组合物。BsAb在其中的比例可为10%～50%不等。多倍杂交瘤细胞的稳定性差，BsAb的产量少且活性低，费时费力，临床应用时存在人抗鼠抗体免疫反应 (HAMA)，因此不适用于临床。 第四节 单克隆抗体的应用 从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B淋巴细胞，提取mRNA并逆转录为cDNA； 应用抗体轻链和重链
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单克隆抗体的制备纯化及鉴定资料.doc
单克隆抗体的制备、纯化及鉴定
一、实验目的：
单克隆抗体制备是细胞免疫学的一个重要里程碑，它涵盖了细胞培养、细胞融合、免疫动物和抗体效价检测等各个方面内容。了解单克隆抗体制备的原理、主要步骤和方法。
二、实验原理：
骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能无限制增殖的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养基[含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养，未融合的脾细
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单克隆抗体的制备纯化及鉴定..doc
单克隆抗体的制备、纯化及鉴定
一、实验目的：
单克隆抗体制备是细胞免疫学的一个重要里程碑，它涵盖了细胞培养、细胞融合、免疫动物和抗体效价检测等各个方面内容。了解单克隆抗体制备的原理、主要步骤和方法。
二、实验原理：
骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能无限制增殖的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养基[含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养，未融合的
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单克隆抗体的制备、纯化及鉴定资料.doc
单克隆抗体的制备、纯化及鉴定
一、实验目的：
单克隆抗体制备是细胞免疫学的一个重要里程碑，它涵盖了细胞培养、细胞融合、免疫动物和抗体效价检测等各个方面内容。了解单克隆抗体制备的原理、主要步骤和方法。
二、实验原理：
骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能无限制增殖的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养基[含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养，未融合的脾细
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红细胞血型单克隆抗体及基因工程抗体的制备的中期报告.docx
红细胞血型单克隆抗体及基因工程抗体的制备的中期报告
本次中期报告将介绍红细胞血型单克隆抗体及基因工程抗体的制备的进展情况，并对下一步计划进行讨论。
1.红细胞血型单克隆抗体的制备
在制备红细胞血型单克隆抗体的过程中，我们首先筛选了一批能够稳定分泌相应抗体的杂交瘤细胞株。接着，我们进行了免疫印迹和酶联免疫吸附实验来确认抗体的特异性和亲和力。经过多次筛选和优化，我们得到了高效稳定的血型单克隆抗体。
目前，我们正在对红细胞血型单克隆抗体进行进一步的鉴定和临床应用的研究，希望能够为血型不匹配输血提供更精确有效的检测手段。
2.基因工程抗体的制备
在基因工程抗体的制备过程中，我们选择了重链和轻链都来自人
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红细胞血型单克隆抗体及基因工程抗体：制备技术、应用与展望.docx
红细胞血型单克隆抗体及基因工程抗体：制备技术、应用与展望
一、引言
1.1研究背景与意义
红细胞血型系统是人类血型中最为重要的部分，其相关抗体在多个医学领域发挥着不可或缺的作用。在输血医学中，确保供受者之间红细胞血型的匹配至关重要。红细胞血型抗体能够识别红细胞表面的特定抗原，若输血时血型不匹配，受血者体内的抗体就会与输入红细胞上的抗原发生免疫反应，导致溶血等严重输血不良反应，甚至危及生命。精准的血型鉴定和抗体检测是保障输血安全的关键环节，可有效降低输血风险，提高输血治疗的成功率。
在疾病诊断方面，红细胞血型抗体也具有重要价值。某些疾病与特定的红细胞血型抗体密切相关，例如新生儿溶血病，主要是由
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2017整理单克隆抗体与基因工程抗体.ppt
单克隆抗体与基因工程抗体 中山医科大学免疫学教研室 张春艳 多克隆抗体 (Polyclonal antibody) 一. 概念 给动物接种抗原所获得的免疫血清或抗血清是多种抗体的混合物, 它是由多种抗原决定簇刺激多株B细胞增殖分化所产生的, 称为多克隆抗体. 二. 多克隆抗体的应用 免疫学检测 被动免疫治疗和紧急预防 三.存在问题 特异性差, 用于免疫学检测容易出现交叉反应 单克隆抗体 (Monoclonal antibody,McAb) 一.概念: 通过B细胞杂交瘤技术, 获得特异性针对某一种抗原决定簇的
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单克隆抗体的制备鉴定与应用研究.pdf
抗百日咳丝状血凝素单克隆抗体的
制备、鉴定与应用研究
徐颖华 孟淑芳 张庶民侯启明 雷殿良
中国药品生物制品检定所，北京，100050
【摘要】 目的制备抗百日咳丝状血凝素(FnA)的单克隆抗体(McAbs)，并建立特异、准确的FHA定量检
测方法。方法采用杂交瘤技术制备McAb，以间接ELISA法筛选获得稳定分泌抗FHA．McAbs的杂交瘤细胞
株，并进行了系统的鉴定和纯化，建立定量检测FHA的ELISA方法。结果获得