蜂蜜中多激素残留的测定 液相色谱-串联质谱法.docx

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DBS61/0012—2022

食品安全地方标准

蜂蜜中16种激素残留的测定液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了蜂蜜中16种激素残留的液相色谱-质谱/质谱的检测方法。

本标准适用于蜂蜜中糖皮质激素（曲安西龙、泼尼松龙、氢化可的松、甲基泼尼松龙、地塞米松、氟米松、曲安奈德、醋酸氟氢松、氟氢可的松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、醋酸泼尼松）、雄性激素（甲睾酮、睾酮）、孕激素（孕酮）、肾上腺皮质激素（醋酸去氧皮质酮）16种激素残留量检测。

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2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样经酶解，用乙腈提取目标化合物后，经固相萃取净化，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

4试剂与材料

除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的一级水。

4.1试剂

4.1.1乙腈（CH3CN,CAS:75-05-8）：色谱纯。

4.1.2甲醇（CH3OH,CAS:67-56-1）：色谱纯。

4.1.3甲酸（CH2O2,CAS:64-48-6）：色谱纯。

4.1.4二氯甲烷（CH2Cl2,CAS:75-09-2）。

4.1.5乙酸铵（CH3COONH4，CAS:631-61-8）。

4.1.6乙酸（CH3COOH,CAS:64-19-7）。

4.1.7阝-葡萄糖醛苷酶/芳香基硫酸酯酶（阝-glucuronidase/arylsufastase）：含有阝-葡萄糖醛苷酶134600

U/mL，芳基硫酸酯酶5200U/mL。

4.1.8无水硫酸钠（Na2SO4,CAS:7757-82-6）：650℃灼烧4h，在干燥器中冷却至室温，贮于密封瓶

中备用。

4.2溶液配制

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4.2.1乙酸铵溶液（0.2mol/L）：称取15.4g乙酸铵，加入1000mL水溶解，用乙酸调节pH到5.2。

4.2.2二氯甲烷-甲醇（6+4，体积比）：60mL二氯甲烷和40mL甲醇混合。

4.2.3甲酸水溶液（0.1%）：准确量取1mL甲酸加水稀释至1000mL。

4.2.4乙腈-水溶液（1+9，体积比）：10mL乙腈和90mL水混合。

4.3标准品

糖皮质激素：曲安西龙、泼尼松龙、氢化可的松、甲基泼尼松龙、地塞米松、氟米松、曲安奈德、

醋酸氟氢松、氟氢可的松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、醋酸泼尼松；雄性激素：甲睾酮、睾酮；孕激素：孕酮；肾上腺皮质激素：醋酸去氧皮质酮，纯度均大于97%，物质英文名称及CAS号见附录A。

4.4标准溶液配制

4.4.1标准储备液（1mg/mL）：分别准确称10.0mg各标准品，精密称定，于10mL容量瓶中，用甲醇

溶解定容至刻度，摇匀，配制为1mg/mL的标准储备溶液，-20℃避光保存，可保存12个月。

4.4.2混合标准中间溶液（1μg/mL）：分别准确量取1mg/mL标准储备液各0.025mL，于25mL容量瓶

中，用水定容至刻度，0℃~4℃避光保存，可保存6个月。

4.4.3混合标准工作溶液：根据需要，临时吸取一定量的混合标准中间溶液（4.4.2）用水稀释，配制成

适当浓度的标准工作溶液0℃~4℃避光保存，可保存6个月。

4.5材料

4.5.1HLB固相萃取柱：60mg/3mL，或相当者。使用前依次用6mL二氯甲烷-甲醇（4.2.2）、6mL甲醇、6mL水活化。

4.5.2氨基固相萃取柱：60mg/3mL，或相当者。使用前用6mL二氯甲烷-甲醇（4.2.2）活化。

5仪器与设备

5.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。

5.2分析天平：感量0.00001g和0.01g。

5.3旋转蒸发仪。

5.4振荡器。

5.5涡旋混匀器：转速3000r/min。

5.6高速离心机：转速4500r/min。

5.7固相萃取装置。

5.8氮吹仪。

5.9聚四氟乙烯离心管：50mL。

5.10有机系滤膜：0.22μm。

5.11移液枪：100μL，1.0mL，10.0mL。

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