GB/T 22261-2008饲料中维吉尼亚霉素的测定　高效液相色谱法.pdf

ICS 65. 120 B 46 中华人民共和国国家标准 GB/T 22261—2008 饲料中维吉尼亚霉素的测定 高效液相色谱法 Determination of virginiamycin in feeds — High performance liquid chromatography 2008-08-01 发布 2008-1 1-01 实施 发布 GB/T 22261—2008 —1— 刖 s 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位：农业部饲料质量监督检验测试中心（南京）。 本标准主要起草人：冯三令、耿士伟、储瑞武、冯群科、贾书静。 I GB/T 22261—2008 饲料中维吉尼亚霉素的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了饲料中维吉尼亚霉素含量的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于配合饲料 、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中维吉尼亚霉素含量的测定，检出限为 0. 5 mg/kg,定量限为 2 mg/kgo 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。凡是注日期的引用文件 ，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682— 1992,neq ISO 3696：1987) GB/T 14699. 1 饲料采样 GB/T 20195动物饲料试样的制备 3原理 饲料中的维吉尼亚霉素用乙酸乙酯提取出来，提取液经硅胶柱和亲水亲脂平衡型固相萃取柱净化， 在高效液相色谱仪(HPLC 反相柱上分离，用紫外检测器(或二极管阵列检测器)在210 nm波长处检 测，根据维吉尼亚霉素和S峰面积加和值用外标法计算饲料中维吉尼亚霉素的含量。 4试剂和溶液 除特殊说明外，所用试剂均为分析纯 ，水为蒸惘水，色谱用水符合GB/T 6682中一级用水规定。 4. 1乙酸乙酯。 4.2无水硫酸钠。 4.3正己烷。 4.4无水乙酸乙酯-正己烷:将乙酸乙酯和正己烷按体积1 + 1混合，通过无水硫酸钠脱水。 4.5乙月青。 4.6甲醇。 4.7乙酸钱缓冲溶液(pH4.0 ：0.05 mmol/L0称取3.85 g无水乙酸钱，溶解于1 000 mL水中，用冰 乙酸调节pH至4. 0。 4.8甲醇-乙酸钱缓冲溶液:将甲醇和乙酸钱缓冲溶液(4. 7)按1 : 3比例混合，摇匀° 4.9 40%甲醇-水溶液:将甲醇和水按4 + 6比例混合,摇匀。 4. 10乙月青：色谱纯，用于配制流动相。 4. 11磷酸。 4. 12流动相：乙月青+水+磷酸=400 + 600 + 1,混匀，用前脱气。 4. 13维吉尼亚霉素标准溶液 4. 13. 1维吉尼亚霉素标准品：维吉尼亚霉素M,和S总和不少于95. 0%。 4. 13.2维吉尼亚霉素标准贮备液：准确称取维吉尼亚霉素标准品(4.13.1)100 mg,置于100 mL棕色