GB/T 19684-2005饲料中金霉素的测定　高效液相色谱法.pdf

ICS 65.120 B 46 遏黔 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T 19684-2005 饲料中金霉素的测定 高效液相色谱法 Determinationofchlortetracyclineinfeeds-Highperformanceliquid chromatography 2005-03-23发布 2005-06-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国家 标 准 化 管 理 委 员 会 GB/T19684-2005 前 言 本标准是在参阅了美国公职分析化学家协会(AOAC方法及国内外大量文献的基础上，根据我国 技术发展水平研究制定的。考虑微生物法和浊度分析法操作时间长，分析难度大，因此采用了高效液相 色谱法(HPLCo 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准负责起草单位 :农业部饲料工业中心。 本标准参加起草单位:国家饲料工程技术研究中心、国家饲料质量监督检验中心(北京)。 本标准起草人:张丽英、李德发、杨文军、王燕华、常碧影、李兰。 GB/T19684-2005 饲料中金霉素的测定 高效液相色谱法 范 围 本标准规定了以高效液相色谱(HPLC)测定饲料中金霉素的方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中金霉素的测定，检测限为 1ng，最低检出浓度为 4mR/kR, 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过在本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注 日期的引用文件，其随后所 有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研 究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注 日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1 饲料 采样 方法原理 使用盐酸一丙酮溶液提取饲料中的金霉素，调至pHl.0^-1.2，振荡，过滤，注人反相柱分离，紫外检 测器检测，外标法定量分析。 试荆和材料 本标准所用试剂，除特别注明外，均为分析纯。水为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T6682 用水的规定。 4.1 氢氧化钠溶液:400g/L, 4.2 乙二酸(草酸)溶液:[c(1/2H,C,Oa)=0.01mol/Ll. 4.3 盐酸溶液:[c(HCI)二4mol/L], 4.4 提取液:丙酮+盐酸溶液(4.3)+水=13+1+60 4.5 流动相:乙二酸溶液((4.2)+乙睛(色谱纯)+甲醇(色谱纯)=10+3+2, 4.6 金霉素标准液: 4.6.1金霉素标准储备液 准确称取金霉素标准品。.01290g(含量大于96.9 ，储存于硅胶干燥器 中)，精确至。.1mg，置于50mL容量瓶中，用提取液((4.4)溶解并定容至刻度，摇匀，其浓度为250g/I， 贮于40C^-6℃冰箱中，有效期为一周 4.6.2 金霉素标准工作液 准确移取4ml金霉素标准储备液(4.6.1)于 10ml容量瓶中，用超纯水 稀释至刻度，摇匀，其浓度为 100g/I，现用现配。 5 仪器、设备 5.1 离心机:3000r/mine 5.2 pH计:精度0.01MV. 5.3 恒温振荡器:300r/mine 5.4 微孔滤膜(孔径0.45pm), 5.5 分析天平:感量0.1mg. 5.6 分析天平:感量 。.01mg. GB/T 19684- 2005 5.7 高效液相色谱仪。 6 试样的选取和制备 按GB/T14699.1选取有代表性样品200g-