免疫吸附操作规范.pptx

酶联免疫吸附.ppt ELISA的类型一）双抗体夹心法测抗原利用待测抗原上的两个抗原决定簇A和B分别与固相载体上的抗体A和酶标记抗体B结合，形成抗体A-待测抗原-酶标抗体B复合物，复合物的形成量与待测抗原含量成正比，属于非竞争性反应。抗体固相抗体保温受检标本抗原洗涤酶标抗体抗体酶标洗涤加底物保温洗涤此法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子（RF）的干扰。采用F（ab‘）或Fab片段作酶结合物的试剂，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。抗体的选

2016-11-04 约字 56页立即下载

酶联免疫吸附试验.pdf 〕一、实验目的了解ELISA的根本原理,掌握间接ELISA方法的原理与操作步骤. 二、实验原理将抗原或抗体固化于某种载体的外表,并保持其免疫活性,参加待检血清〔抗体〕, 然后参加与其相对应的既有酶活性又有免疫活性的酶标抗体或抗原,它们之间反响后, 通过洗涤去掉未结合的标记物.参加酶反响的底物后,底物被酶催化变为有色产物,酶的降解底物和呈现的色泽在一定条件下是呈正比的,故可根据颜色反响的深浅进行定性或定量分析,因此可用分光光度计进行测定,计算出参加反响的抗原或抗体的含量,从而到达测定抗原或抗体的目的. 阮储吸附下卜加流拄曲湎c蚌井竹沆体找体衣ifij :与糜AR J01标抗花体C抗

2024-06-08 约5.29千字 4页立即下载

酶联免疫吸附试验.doc 实验二酶联免疫吸附试验 1.实验目的 ①了解ELISA反应原理、类型及特点 ②掌握直接ELISA操作步骤 ③通过实验认识抗体的双重性 2.实验原理 ① 抗原或抗体能物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，吸附后的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。 ②酶可与抗体通过共价键连接而形成酶标记抗体，这种结合作用并不影响抗体的免疫学活性和酶的催化活性。 ③酶标抗体中的酶可催化无色底物形成有色产物，酶标抗体与相应抗原或抗体结合后，可根据有无颜色反应来判定是否有免疫反应发生，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比，因此，可以按底物显色的程度来显示试验结果。 3

2017-02-04 约字 5页立即下载

酶联免疫吸附试验.ppt 固相抗原标本（含抗体）酶标二抗底物EEE3.原理第31页，共73页，星期日，2025年，2月5日4.加酶作用的底物显色2.加待检抗体洗涤1.已知抗原包被载体（+）YYY3.加酶标二抗洗涤YYYYEYEYEYYYYEYEYE4.加酶作用的底物不显色2.加待检物（无抗体）洗涤1.已知抗原包被载体（-）3.加酶标二抗洗涤YEYEYE洗涤洗涤4.操作步骤第32页，共73页，星期日，2025年，2月5日（五）双抗原夹心法检测抗体用同一种抗原分别作为酶标抗原和固相抗原以检测抗体的方法用于抗体的检测1．原理2．应用第33页，共73页，星期日，2025年，2月5日E固相抗体标本（含抗体）酶标抗原底物EE3.原

2025-03-17 约6.52千字 73页立即下载

酶联免疫吸附测定.ppt 酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA ）免疫学教研室免疫荧光技术课程内容 ELISA的原理 ELISA的分类间接ELISA的具体操作 ELISA在医学中的应用实例 ELISA的原理 1.抗原抗体反应的特异性 2.抗原或抗体的固相化 3.抗原或抗体的酶标记间接ELISA 实验目的：测小鼠IgG免疫兔血清中抗小鼠IgG抗体的效价实验材料：包被抗原：小鼠血清待检抗体/一抗：兔抗小鼠IgG

2016-11-01 约3.65千字 22页立即下载

酶联免疫吸附实.ppt 一、实验目的 1.掌握酶联免疫吸附试验的基本方法及原理 2.掌握酶联免疫吸附试验结果的观察与判断 3.了解ELISA在微生物检测中的应用二、实验原理抗原或抗体结合到固相载体的表面仍保持其活性抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后，仍保持其免疫活性和酶活性标本中的抗原或抗体、标记抗原或抗体能按一定的次序与固相载体表面的抗原或抗体反应，并通过底物与酶的反应来反映标本中的抗原或抗体的量三、实验材料 1.器材 1）酶联免疫检测仪 2）12联孔聚苯乙烯条 3）37℃温箱 4）微量加液器及移液器头 2.试剂 1）包被液 2）pH7.4磷酸盐缓

2017-06-18 约1.18千字 8页立即下载

酶联免疫吸附试.ppt ;ELISA的基本原理;④用洗涤的方法去除未结合的酶标抗原（或抗体），最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 ⑤加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物。 ⑥产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来定性或定量分析。;;ELISA的类型;一、双抗体夹心法;二、间接法测抗体 ;三、酶标抗原竞争法;间接ELISA方法的建立;ELISA操作步骤;3、封闭：各孔加入封闭液200ul，37℃作用1h； 4、洗涤； 5、加被检血清：将血清样品稀释至最佳浓度，每孔100μL，每个样本两孔，每块板同时设阴性、阳性及空白对照各两孔，37℃作用30mi

2017-06-14 约1千字 14页立即下载

免疫吸附100409.ppt 免疫吸附与系统性红斑狼疮等风湿免疫病目录背景现况本院资料个人体会目录背景现况本院资料个人体会将具有高度特异性的抗原、抗体或具有特定理化亲和力的物质（配基）与吸附材料（载体）结合，制成吸附柱，使其可以选择性或特异性地吸附体内相应的致病因子，以达到治疗疾病的目的。 免疫吸附概念根据吸附剂与被吸附物之间的作用原理分类生物亲和型吸附剂特异性高，制备、灭菌及储存要求高抗原抗体结合型、补体结合型、Fc结合型物理化学亲和型吸附剂特异性差，制备方便，活性稳定静电结合型、疏水结合型 免疫吸附的分类理化亲和疏水结合静电结合色氨酸（ TR-350）苯丙

2017-02-12 约2.78千字 31页立即下载

酶联免疫吸附实验.ppt 酶联免疫吸附实验;掌握酶联免疫吸附试验（ELISA）旳原理熟悉酶联免疫吸附试验旳操作措施了解其他免疫标识技术;二、试验原理; 是指用荧光素、放射性同位素、酶、发光剂或电子致密物质等作为示踪剂，标识抗体或抗原进行旳抗原抗体反应。特点：高度敏捷、特异、迅速，定性、定量、定位分类：免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫技术、免疫电镜技术、免疫胶体金技术和发光免疫测定。;免疫标识技术=;;是将抗原和抗体旳特异性免疫反应与酶旳催化反应相结合而建立旳一种免疫检测技术。就是利用酶标识抗体或抗原，以检测相应抗原或抗体旳一种免疫学标识技术。 Ag+AbEAgAbE +底物呈色反应;是一类常用旳酶免疫技

2025-05-07 约3.59千字 43页立即下载

2017-05-21 约小于1千字 30页立即下载

酶联免疫吸附测定.ppt 酶联免疫吸附测定〔Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,ELISA〕;用示踪物质标记抗体或抗原，使其与相应的抗原或抗体反响，使微量的、不可见的反响成为可见的或可测定的。;免疫荧光技术;用FITC-抗IgM单抗计数B细胞;课程内容;ELISA的原理;间接ELISA;操作步骤;倍比稀释法与加样;;ELISA的分类;间接法的原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。其优点在于只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。可用于传染病的诊断。 ;〔三〕双抗体夹心法〔测抗原〕;;病原微生物及其抗体检测如:肝炎病毒,SARS

2025-05-27 约小于1千字 22页立即下载

培训课件：酶联免疫吸附试验(ELISA)操作要点解析.ppt 酶联免疫吸附试验(ELISA)操作要点解析;ELISA简介：基本原理与类型;ELISA的应用领域：科研与临床诊断;ELISA试剂盒的组成与选择;ELISA实验前的准备工作：试剂配制;样品处理与稀释的注意事项;包被步骤详解：包被液的选择;包被浓度的优化;包被时间的控制;洗涤步骤的重要性：洗涤液的选择;洗涤次数与时间的优化;封闭步骤：封闭剂的选择;封闭时间的控制与优化;抗体稀释液的选择与优化;一抗孵育的条件：温度与时间;一抗浓度的优化与调整;二抗的选择与标记物;二抗孵育的条件：温度与时间;二抗浓度的优化与调整;底物溶液的配制与选择;底物反应时间的控制;终止液的选择与使用;酶标仪的选择与校准;读数前

2025-03-08 约小于1千字 56页立即下载

酶联免疫吸附试验操作注意事项.ppt 产生非特异性显色的原因试剂盒因素：固相载体原料的不同和制作工艺的差别、包被物的提纯度、固相载体表面未被包被的空隙封闭不良等；人为因素：加样、洗板、温育、判断结果中的操作不当或责任心不强等造成假阳性或假阴性；标本中含有干扰物：1.内源性干扰物——包括类风湿因子(RF)、黄疸等：类风湿因子可作用于多种动物及人IgGFc段的自身抗体，多数为IgM类，能充当抗原成分与固相的酶标记抗体反应，从而呈非特异性显色；黄疸血标本中常含有内源性过氧化物酶，如用HRP为标记物,测定有可能产生非特异性显色。2.外源性干扰物——常常因样品采集、储存、处理不当造成的样品溶血，被细菌污染，标本凝集不全等。第30页,共35页

2024-04-01 约6.13千字 35页立即下载

酶联免疫吸附试验操作注意事项.ppt 关于酶联免疫吸附试验操作注意事项第1页，共35页，星期日，2025年，2月5日酶免疫测定类型这种固相酶免疫测定方法在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定（EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay），简称ELISA。酶免疫技术酶免疫组化酶免疫测定均相酶免疫测定非均相酶免疫测定固相酶免疫测定液相酶免疫测定第2页，共35页，星期日，2025年，2月5日ELISA原理（以一步法双抗体夹心法测抗原为例）ELISA其原理为抗原抗体特异性结合和抗原抗体的酶标记，以酶催化底物显色来判断结果。第3页，共35页，星期日，2025年，2月5日影响酶联免疫测定的因素较多,诸如标本的采集保存、

2025-03-25 约4.77千字 35页立即下载

酶联免疫吸附实验ELISA--操作规则新手适用.doc PAGE PAGE 30 酶联免疫吸附实验 ELISA －－操作规则（新手适用）一、实验目的酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay 简称ELISA)是在免疫酶技术(immunoenzymatic techniques)的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术，ELISA过程包括抗原(抗体)吸附在固相载体上称为包被，加待测抗体(抗原)，再加相应酶标记抗体(抗原)，生成抗原(抗体)--待测抗体(抗原)--酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体(抗原)的量。待测抗体(抗原)的定量与有色产生

2017-04-19 约2万字 31页立即下载