微生物发酵产酶(五、一).pptx

第六节微生物发酵产酶;酶的生产方法;微生物发酵产酶;一、酶发酵生产的类型;2、液体深层发酵（目前酶发酵生产的主要方式）

液体培养基，经灭菌、冷却后，接入产酶细胞，在一定条件下发酵。;3、固定化细胞发酵（70年代后期发展）

将细胞固定在载体上后，进行发酵生产。

优点：细胞密度高，可反复使用，利于产品分离纯化

缺点：需要特殊的固定化细胞反应器，只适用胞外酶生产

4、固定化原生质体发酵（80年代中期发展）

原生质体是指除去了细胞壁的微生物细胞或植物细胞。

优点：解除细胞壁扩散阻碍；易于细胞间质中的酶的

分泌；可反复或连续使用

缺点：制备复杂，维持较高的渗透压，需防止细胞壁再生;1、酶合成的诱导作用;2、酶合成的阻遏;三、酶生物合成的模式;微生物细胞在一定条件下培养生长，其生长过程一般经历延滞期、生长期、稳定期和衰亡期等4个阶段;（二）酶生物合成的模式;1、同步合成型;

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;属于滞后合成型的酶，之所以要在细胞生长一段时间甚至进入稳定期以后才开始合成，主要原因是由于受到培养基中存在的阻遏物的阻遏作用。只有随着细胞的生长，阻遏物几乎被细胞用完而使阻遏解除后，酶才开始大量合成。若培养基中不存在阻遏物，该酶的合成可以转为延续合成型。;小结：;第二节产酶微生物的特点;（一）常用的产酶微生物;1、细菌

大肠杆菌（Escherichiacoli）

形态：杆状，革兰氏阴性，运动或不运动，无芽孢，一般无荚膜。菌落呈白色至黄白色，扩展，光滑，闪光。

易于在实验室操作、生长迅速，而且营养要求低。

应用最广泛的产酶菌，一般分泌胞内酶。常在工业生产中应用于生产谷氨酸脱羧酶、天冬氨酸酶、限制性核酸内切酶等。;醋酸杆菌（Acetobacter）;枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）;2、放线菌(Actinomycetes)

放线菌是一类具有分支状菌丝的单细胞原核微生物,由于菌落呈放射状而得。

放线菌菌落中的菌丝常从一个中心向四周辐射状生长,因此叫放线菌。;放线菌产酶举例

链霉菌：葡萄糖异构酶、青霉素酰化酶、纤维素酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、几丁质酶等???;3、霉菌（molds）

霉菌:是一类丝状真菌。构成霉菌菌体的基本单位称为菌丝（hyphae），呈长管状，可不断自前端生长并分支。大量菌丝交织成绒毛状、絮状或网状等，称为菌丝体（mycelium）。菌丝体常呈白色、褐色、灰色。霉菌繁殖迅速，常造成食品、用具大量霉腐变质，但许多有益种类已被广泛应用，是人类实践活动中最早利用和认识的一类微生物。;选用不同的霉菌作为发酵菌种，不仅可以酿制酱、酱油、醋、豆腐乳等食品，还可以应用于生产有机酸、酶制剂、维生素、生物碱及激素等多种产品;

据统计，在550种酶制剂中有近1/3是霉菌产生的。;霉菌产酶举例

;生产糖化酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶、果胶酶、过氧化氢酶、脂肪酶等；;米曲霉（Aspergillusoryzae）;红曲霉（Monascus）;

青霉是世界分布最广的几类真菌之一。生产葡萄糖氧化酶、苯氧甲基青霉素酰化酶、纤维素酶等。

;木霉（Trichoderma）;根霉(Rhizopus);4、酵母

啤酒酵母：丙酮酸脱羧酶、醇脱氢酶等。

假丝酵母：脂肪酶、尿酸酶、尿囊酸酶、转化酶、醇脱氢酶等。;第二节发酵产酶工艺条件及其控制;[原料][原始菌种][麸皮等原料]

↓↓

饼粕等原料淀粉质原料试管斜面培养(活化)[配制培养基]

↓↓↓(灭菌)

按不同原料净化、粉碎摇瓶等分级扩大培养

作不同处理↓↓

水解种子罐培养