《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计.doc

《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计 教学目标：? 1、知识目标：? 利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。 2、能力目标?： 分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性。 3、情感目标?： 形成细菌无处不在的概念，养成讲究卫生的习惯。???????????? 教学重点：? 对土样的选取和选择培养基的配制????????????? 教学难点：? 对分解尿素的细菌的计数???? ??? 教学过程:?????????? 一、新课导入：上节学习了培养基的配置以及接种技术，下面来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。 二、学习新课： 1.研究思路：（1）筛选菌株：原理人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长 。生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。 （2）设计对照：对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 2实验设计： 2.1实验设计流程： 2.2实验过程 1．? 土样的采集 在长期使用尿素的农田内采集3-8cm深的土样200g用信封或牛皮纸袋带回实验室。 2．? 培养基的制备 培养基配方 KH2PO4 1．4g Na2HPO4 2．1g MgSO4· 7H2O 0．2g 葡萄糖 10．0g 尿素 1．0g 琼脂 15．0g 将上述前5种物质溶解后，用容量瓶定容至1000ml。然后倒入大搪瓷烧杯中，并向其中加入琼脂15．0g，用电炉加热至琼脂完全溶解。在培养基半冷却时分装至经高压灭菌的培养皿中。冷却备用。 3．? 样品的稀释 取10g土样容于90g水中，充分摇匀，然后在此溶液中取菌液1ml加无菌水9ml中继续稀释。以此方式继续将菌液稀释成一定浓度梯度。将稀释10000倍，100000倍及1000000倍的菌液各取0.1ml分别加入到事先加入培养基的培养皿中，轻轻摇动培养皿使菌液分布均匀。每种浓度重复3次。? 4．? 培养 将接种后的培养皿标记后室温培养48～72小时。 5．? 记数 记录各浓度（菌液稀释倍数）下每培养皿内菌落的数目，计算3个培养皿内的平均值，进而计算出每克土壤中所含的细菌的数目。 ?2.3结果分析与评价 1．对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。 2．在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成 氨 。氨会使培养基的碱性 增强 ，PH 升高 。因此，我们可以通过检测培养基 pH 变化来判断该化学反应是否发生。 3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红 ，说明该细菌能够分解尿素 配制土壤溶液 系列稀释 涂布平板与培养 菌落计数