第二十章 经典液相色谱法.PPT

第二十章 经典液相色谱法 ;经典液相色谱法;第一节 吸附色谱法 ;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法; Rf与分配系数K及容量因子k之间的关系为： Rf Rf值为常数，其值在0～1之间。 Rf =0，表示化合物在薄层上不随溶剂的扩散而移动，仍在原点位置； Rf =1，表示溶质不进入固定相，即表示溶质和溶剂同步移动。 一般要求Rf值在0.2～0.8之间。 ;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;2．薄层扫描法 该法快速、简便，结果灵敏、准确，适用于多 组分物质和微量组分的定量。 （1）薄层扫描仪 薄层扫描仪光学 系统结构示意图;第一节 吸附色谱法; 吸收参数（KX）与样品浓度成正比，所以无论是反 射法还是透射法，测得值与样品之间都不呈线性。 透射法测定时，SX值越大，吸光度越大；反射法测 定时，SX值越大，反射度越小。 SX值取决于薄层吸附剂的性能、粒度和分布情况。 SX值要预先测定，通过仪器的线性补偿器，用电路系统 将弯曲的曲线校正为直线后用于定量。 线形校正 1-校正前的标准曲线 2-校正后的标准曲线;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;;第一节 吸附色谱法;第一节 吸附色谱法;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第二节 分配色谱法 ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;1. 阳离子交换树脂 以阳离子作为交换离子的树脂，其中可电离的 H+离子与溶液中某些阳离子进行交换。 苯乙烯树脂是由苯乙烯和二乙烯苯经聚合，磺 化而成，是最常用的阳离子交换树脂。 ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ;第三节 离子交换色谱法  ; ;第三节 离子交换色谱法  ;第四节 尺寸排阻色谱法  ;一、基本原理 (一)分子筛效应 根据溶质分子大小不同即分子筛效应而进行分离 大分子的流程短，移动速度快，先流出色谱柱；小分子的流程长，移动速度慢，后流出色谱柱；中等分子居两者之间。这种现象叫分子筛效应。 ; (二)分配系数 保留体积VR＝V0+KVi 如果溶质分子足够小，能自由进出凝胶颗粒 内部，而且对凝胶的内水和外水亲合力相等，此 时洗脱体积就等于外水体积和内水体积之和。即 VR＝V0+Vi，则K＝1； 如果溶质分子足够大，以致完全排阻于凝胶 颗粒之外，此时洗脱体积就等于外水体积。即 VR＝V0，则K＝0。 在通常的工作范围内，对一切溶质来说，K 是一个常数(0≤K≤1)。 ;第四节 尺寸排阻色谱法  ;第四节 尺寸排阻色谱法  ;第四节 尺寸排阻色谱法  ;第四节 尺寸排阻色谱法  ;第四节 尺寸排阻色谱法  ; 除以上基本要求外，可根据分离对象和分离要求选 择适当型号的凝胶。 1. 组别分离 即从小分子物质(K＝1)中分离大分子物质(K＝0)或 从